 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4131 | 回復(fù): 4 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
liumangtu403鐵蟲 (小有名氣)
|
[求助]
請(qǐng)教有關(guān)提取人肝臟組織RNA提取的技術(shù) 已有3人參與
|
||
|
各位高手，本菜鳥提取肝組織RNA大半個(gè)月仍未能成功，跪求各位高手幫助，感激涕零！ 我將組織放在研缽中液氮研磨， 將組織研磨到粉末后加1ml trizol到研缽中，繼續(xù)研磨成粉末后放入超凈臺(tái)中等待融化，之后將液體吸入EP管進(jìn)行RNA提取。說明書上提到1ml TRIZOL可以溶解50——100mg組織，但我加入50mg組織后產(chǎn)生大量沉淀，且液體呈現(xiàn)黑色，似乎無法溶完這么多組織，且后續(xù)電泳表明RNA降解，而加入較少的組織(10mg左右)提取的RNA又很少，估計(jì)只有幾微克，濃度太低無法使用。想請(qǐng)問各位高手，肝組織是RNA含量較高的組織，為何我研磨的很細(xì)了還是提不出足夠量的RNA？1mlTRIZOL應(yīng)溶解多少mg組織合適？ 另外列上后面的RNA提取步驟，請(qǐng)各位高手指正： 1、TRIZOL移入EP管后，吹打混勻（我們實(shí)驗(yàn)室沒有勻漿機(jī)，只能將粉末研磨到足夠細(xì)） 2、12000rmp離心10分鐘離去不溶物（省略該部是否會(huì)影響RNA得率？） 3、室溫放置10min, 加入氯仿200ul/每管，劇烈震蕩15s,冰上放置5min(有網(wǎng)友提到要放置15min,但我放置15min后離心上層呈現(xiàn)淡黃色，蛋白層變薄，不知有沒有問題) 4、取上清（上清的液體量多是否表明RNA得量多？） 5、500ul 異丙醇沉淀，冰置10min,12000rmp離心10min. 6、1ml 75%乙醇洗一遍，12000rmp 離心5min 7、超凈臺(tái)晾干5min,加入Rnase-free 水 急盼各位高手回復(fù) ，謝謝！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
299求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿北京理工大學(xué)本科211材料工程294求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
300求調(diào)劑，材料科學(xué)英一數(shù)二
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
招收生物學(xué)/細(xì)胞生物學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
070305高分子化學(xué)與物理 304分求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
289求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)材料與化工方向336分
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
調(diào)劑求院校招收
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
調(diào)劑310
已經(jīng)有8人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- RNA提取后，看不到沉淀，能說明沒有RNA嗎？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 請(qǐng)教RNA提取高手：反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR)中DNA的去除
已經(jīng)有18人回復(fù)
- RNA 提取的一些問題，請(qǐng)大家?guī)兔卮?/a>
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 有關(guān)提取全血DNA和RNA問題。
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 請(qǐng)問血清RNA怎樣提取？又怎樣驗(yàn)證已提取出血清RNA？
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 昆蟲RNA 提取！電泳圖，看不懂！請(qǐng)高手指點(diǎn)！
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 關(guān)于RNA提取的問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- RNA提取時(shí)超凈工作臺(tái)的應(yīng)用等？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)教高手關(guān)于從細(xì)胞中提取總RNA
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于提取RNA所用槍頭的處理問題
已經(jīng)有26人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)教植物RNA提取和轉(zhuǎn)錄組學(xué)
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 提取RNA及用DEPC去除RNase的個(gè)人總結(jié)(轉(zhuǎn)）
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 有關(guān)RNA提取的問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
實(shí)驗(yàn)加油
禁言 (初入文壇)
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
4樓2018-12-10 10:52:23
2樓2012-08-14 18:25:00
可憐我的生活
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 2140.6
- 紅花: 1
- 帖子: 104
- 在線: 21.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 2951383
- 注冊(cè): 2014-01-26
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2018-10-21 20:18:55
【答案】應(yīng)助回帖
| 用Trizol能提RNA的，個(gè)人比覺得還要需要從提量下手，我們實(shí)驗(yàn)室用BIODAI離心提取法單次處理的樣本量可以達(dá)到1000μL，樓主需要注意用Trizol每個(gè)步驟操作要快，用的時(shí)間藥短些，防止RNA降解,異丙醇沉淀的時(shí)候，放-20°C的冰箱半個(gè)小時(shí)，或再適當(dāng)延長一點(diǎn)時(shí)間。迅速離心，之后加75%乙醇。只洗一遍，洗2遍易損失部分RNA。不要過分干燥，管內(nèi)稍有點(diǎn)殘余的乙醇也沒關(guān)系。干燥一會(huì)就迅速加DEPC水少量。提取RNA之后迅速反轉(zhuǎn)錄成cDNA再保存。 |
5樓2019-03-11 09:03:09
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 2026年華南師范大學(xué)歡迎化學(xué)，化工，生物，生醫(yī)工等專業(yè)優(yōu)秀學(xué)子加入！ +3 | llss0711 2026-03-28 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +7 | 宋明欣 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿北化085600材料專碩275|有文章專利｜求調(diào)劑 +7 | Micky11223 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085602 化工專碩 338分 求調(diào)劑 +12 | 路癡小琪 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)324求調(diào)劑 +7 | hanamiko 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 材料與化工考研調(diào)劑
+17
|
孅華 2026-03-22 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +11 | 陽陽哇塞 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研]
 一志愿 西北大學(xué) 總分282 英語一62 求調(diào)劑
+7
|
18419759900 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分，求調(diào)劑 +9 | 大饞小子 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +4 | 小懶蟲不懶了 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 315調(diào)劑 +4 | 0860求調(diào)劑 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 林之夕 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
085602 289分求調(diào)劑
+8
|
WWW西西弗斯 2026-03-24 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +6 | Koxui 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +3 | wcq131415 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | 13853210211 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 化工專碩求調(diào)劑 +3 | question挽風(fēng) 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 277分求調(diào)劑，跨調(diào)材料 +3 | 考研調(diào)劑lxh 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 335求調(diào)劑 +4 | yuyu宇 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿國科過程所081700，274求調(diào)劑 +3 | 三水研0水立方 2026-03-23 | 3/150 |
|