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XUMIN6891金蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于表達(dá)的問題
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| 各位大蝦你們好！我最近做表達(dá)，一直沒結(jié)果，我做的是串聯(lián)表達(dá)，我在原來三個(gè)重復(fù)串聯(lián)片段的基礎(chǔ)上延長(zhǎng)成六個(gè)重復(fù)，12個(gè)重復(fù)，結(jié)果六個(gè)重復(fù)的片段誘導(dǎo)條件的優(yōu)化有目的蛋白表達(dá)，而12重復(fù)的卻一直沒有，我用的pET30a（+）載體，6個(gè)重復(fù)片段加上載體序列表達(dá)蛋白是22.2KD，12重復(fù)片段加上載體序列表達(dá)蛋白大小應(yīng)該是38.1KD,但是在這個(gè)位置我一直做出的結(jié)果是未誘導(dǎo)的條帶比誘導(dǎo)的還粗，后來我又用個(gè)空菌落BL21也做個(gè)對(duì)照，結(jié)果它在那個(gè)位置也有條帶！這應(yīng)該如何辦啊，是不是就證明表達(dá)不出來�。≌�(qǐng)各位高手給于小妹指導(dǎo)一下，萬分感謝！ |
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panda73
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2樓2012-03-06 21:42:04
XUMIN6891
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panda73
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4樓2012-03-06 22:07:18
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5樓2012-03-07 19:59:48
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