 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2907 | 回復(fù): 4 | ||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 MolEPI ，點擊這里進行查看 | ||||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
[交流]
模板濃度高會影響反轉(zhuǎn)錄結(jié)果嗎?
|
||||
|
我用同一種的模板，做了兩次反轉(zhuǎn)錄，第一次加10微升模板，40微升反轉(zhuǎn)錄體系；第二次加15微升模板，同樣試劑盒，40微升反轉(zhuǎn)錄體系。然而第二次反轉(zhuǎn)錄出來的cDNA濃度比第一次還要低，很奇怪。 我知道模板濃度高會影響反轉(zhuǎn)錄效率，但是怎么還會降低cDNA的濃度？我總認為如果模板濃度過高，反轉(zhuǎn)不下去，也就達到40微升體系中CDNA的最大濃度，不知這個想法是否是錯誤的？請各位多指教``` |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有149人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 請教RNA提取高手：反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR)中DNA的去除
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 反轉(zhuǎn)錄高手進來~~
已經(jīng)有8人回復(fù)
- RNA濃度只有幾十ng/ul，不知道可不可以反轉(zhuǎn)錄做RT（在線急等）
已經(jīng)有12人回復(fù)
- cDNA做普通PCR擴不出條帶來
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 求助，PCR的電泳結(jié)果出了未知問題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】提血液RNA濃度很低，怎樣使其濃度高從而用于反轉(zhuǎn)錄
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助/交流】5'Race反復(fù)做不出來，該怎么辦
已經(jīng)有74人回復(fù)
- 【求助/交流】RT-PCR不成功
已經(jīng)有25人回復(fù)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
愿遇見你，遇見不止擦肩而過的緣分
+1/76
-
飄在美國，有點想家
+1/62
-
加拿大阿爾伯塔大學招收電磁、無線通信、機器學習方向全獎碩士/博士/博士后/訪問學者
+1/53
-
0854電子信息調(diào)劑，閩南師大光電芯片研發(fā)實驗室
+1/42
-
上海交大化院功能大分子團隊招2026年碩士、聯(lián)培、博士后
+1/36
-
天津工業(yè)大學航空航天博士招生
+1/32
-
【武漢高�！俊拘履茉床牧吓c器件課題組】 招收優(yōu)秀碩士調(diào)劑生�。�！
+5/15
-
北京某研究院生物化學與分子生物學相關(guān)專業(yè)申請考核制博士招生（春季）
+1/14
-
南京醫(yī)科大學-膜蛋白結(jié)構(gòu)與功能課題組-招收2026級博士研究生
+1/11
-
【博士招生】武漢科技大學招收材料、化工、環(huán)境、冶金類2026年“申請-考核”制博士生
+1/8
-
上�？萍即髮W物質(zhì)學院招收有機化學方向2026級工程博士
+1/7
-
福建師范大學化學與材料學院杜克釗團隊博士招生
+1/5
-
招收化工與材料學科點研究生
+1/4
-
求調(diào)劑｜一志愿廣東工業(yè)大學控制工程｜總分355｜本科電氣｜有項目/競賽/論文經(jīng)歷
+1/4
-
武漢紡織大學杰青團隊招研究生（材料，化學，高分子，化工）
+1/4
-
“機械、材料”招生
+1/3
-
北京高校副校長團隊招收機械類，環(huán)境類學碩和專碩
+1/2
-
南方科技大學（同位素）化學及應(yīng)用方向博士后招聘（2名）
+1/2
-
西安交通大學生命學院智能化診療裝備研究中心2026年博士生招生
+1/1
-
福建師范大學環(huán)境微生物技術(shù)課題組接受2026級碩士調(diào)劑
+1/1
5樓2012-03-22 13:31:23
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
koko1210(金幣+1): 謝謝參與
送鮮花一朵
wanhscn(金幣+8, MolEPI+1): very good! 授予專家指數(shù)！辛苦！ 2012-03-15 00:01:26
koko1210(金幣+1): 謝謝參與
送鮮花一朵wanhscn(金幣+8, MolEPI+1): very good! 授予專家指數(shù)！辛苦！ 2012-03-15 00:01:26
|
加模板不是要看體積，要看RNA的量哦。反轉(zhuǎn)錄試劑盒上會有關(guān)于RNA模板用量的說明，可參考下。不知道你用了多少RNA，所以不好說。RNA過量至少帶來2個問題： 1.反轉(zhuǎn)錄酶能力有限，RNA過量會造成反轉(zhuǎn)錄不完全，就是說有的RNA沒能反轉(zhuǎn)錄成cDNA。如果用來定量，結(jié)果就會不準確。 2.提取RNA的過程中使用的試劑會影響酶活性，所以體積不能加太多，一般不要超過反轉(zhuǎn)錄體系的1/10（具體請參考試劑盒說明書）。 另外，測cDNA濃度是很奢侈的行為。反轉(zhuǎn)錄酶那么貴，cDNA是很珍貴的，不要浪費。一般的做法是測RNA濃度，然后不同樣品都使用同樣量的RNA去做反轉(zhuǎn)錄，這樣得到的不同樣品的cDNA就可以認為濃度是一樣的。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
2樓2012-03-14 22:28:20
3樓2012-03-15 17:57:05
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語六級551，有科研經(jīng)歷 +3 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-16 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +6 | lemonzzn 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 化工學碩306求調(diào)劑 +10 | 42838695 2026-03-12 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑 ，六級已過，有科研經(jīng)歷 +10 | 曦熙兮 2026-03-15 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +10 | 呼呼呼。。。。 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +8 | 大可digkids 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +3 | 梁梁校校 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +9 | 負心者當誅 2026-03-11 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料專碩326求調(diào)劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工專碩調(diào)劑 +5 | heming3743 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +5 | 素年祭語 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 機械專碩調(diào)劑
+3
|
笨笨兔子 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程315分求調(diào)劑 +3 | yang_0104 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | z1z2z3879 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈工大材料324分求調(diào)劑 +5 | 閆旭東 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | 一定有學上- 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 是Lupa啊 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 277求調(diào)劑 +4 | anchor17 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0817化學工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|