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[交流]
請問農(nóng)桿菌EHA105有鏈霉素抗性嗎？ 已有3人參與
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| 如題。網(wǎng)上看了些資料說是這個(gè)菌株只抗利福平，但身邊也有人說抗鏈霉素的。馬上要做實(shí)驗(yàn)了，十分的不踏實(shí)呢.... |
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西瓜
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2樓2012-03-18 17:31:30
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本來就是要靠這個(gè)特性來判斷手頭上的菌種是不是這個(gè)菌株的.... 已經(jīng)看過前人的討論了，有的人說有，有的人說沒有，搞得我都暈了，然后才發(fā)這個(gè)貼的... 剛看到原作者對這個(gè)問題的回復(fù)了： It is true that EHA105 should have only rif-resistance (on the chromosome). However, when I made the strain, I used pPH1JI as an eviction plasmid to do the double homologous recombination. pPH1JI encodes spec resistance. We have a version of the strain that has lost pPH1JI and is spec-sensitive. Sincerely, Stan 這么說是只有利福平抗性了？ |
3樓2012-03-18 18:06:34
西瓜
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……這個(gè)回復(fù)就糾結(jié)了。 作者說，本來呢，EHA105這東西，應(yīng)該是只有Rif抗性的（染色體編碼）。但是在做這菌株的時(shí)候使用了pPH1JI 這個(gè)驅(qū)逐質(zhì)粒，pPH1JI 本身編碼Spec抗性基因。所以：如果你的菌株不含pPH1JI 質(zhì)粒，那么它就只有Rif抗性；如果含pPH1JI 質(zhì)粒，那么就同時(shí)帶Rif抗性和Spec抗性。 你可以檢測下你的菌株含不含這個(gè)質(zhì)粒就知道了。 另外，作者最后說，他們有確定不含pPH1JI質(zhì)粒（不帶Spec抗性）的EHA105，你也可以考慮問他要這個(gè)。 |
4樓2012-03-18 18:24:01
5樓2012-03-18 23:23:20
西瓜
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6樓2012-03-19 09:08:28
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西瓜: 金幣+2, 鼓勵(lì)反饋！ 2012-03-20 15:43:37
西瓜: 金幣+2, 鼓勵(lì)反饋！ 2012-03-20 15:43:37
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試驗(yàn)的結(jié)果出來了，也許已經(jīng)沒什么意義了，也發(fā)上來吧。 前兩天拿自己實(shí)驗(yàn)室的菌種和別的實(shí)驗(yàn)室的菌種做了一下試驗(yàn)，自己的菌種是一直加strep 50mg/L和rif養(yǎng)的，借來的菌種一直只加rif。各取4個(gè)單菌落劃到strep濃度梯度平板。培養(yǎng)約40h。 結(jié)果是，自己實(shí)驗(yàn)室的能耐75mg/L或者以上的strep 借來的只能耐受最高50mg/L的strep 看來我們這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室的菌株都帶pPH1JI質(zhì)粒。 現(xiàn)在不糾結(jié)這個(gè)問題了，很感謝西瓜版熱心的回復(fù)呢  |
7樓2012-03-20 15:21:55
king-long
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8樓2015-01-25 23:56:19
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9樓2015-01-26 00:00:07
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10樓2015-03-20 22:14:01
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