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[交流]
請問農(nóng)桿菌EHA105有鏈霉素抗性嗎？ 已有3人參與
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| 如題。網(wǎng)上看了些資料說是這個菌株只抗利福平，但身邊也有人說抗鏈霉素的。馬上要做實驗了，十分的不踏實呢.... |
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西瓜: 金幣+2, 鼓勵反饋！ 2012-03-20 15:43:37
西瓜: 金幣+2, 鼓勵反饋！ 2012-03-20 15:43:37
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試驗的結(jié)果出來了，也許已經(jīng)沒什么意義了，也發(fā)上來吧。 前兩天拿自己實驗室的菌種和別的實驗室的菌種做了一下試驗，自己的菌種是一直加strep 50mg/L和rif養(yǎng)的，借來的菌種一直只加rif。各取4個單菌落劃到strep濃度梯度平板。培養(yǎng)約40h。 結(jié)果是，自己實驗室的能耐75mg/L或者以上的strep 借來的只能耐受最高50mg/L的strep 看來我們這兩個實驗室的菌株都帶pPH1JI質(zhì)粒。 現(xiàn)在不糾結(jié)這個問題了，很感謝西瓜版熱心的回復(fù)呢  |
7樓2012-03-20 15:21:55
西瓜
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2樓2012-03-18 17:31:30
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本來就是要靠這個特性來判斷手頭上的菌種是不是這個菌株的.... 已經(jīng)看過前人的討論了，有的人說有，有的人說沒有，搞得我都暈了，然后才發(fā)這個貼的... 剛看到原作者對這個問題的回復(fù)了： It is true that EHA105 should have only rif-resistance (on the chromosome). However, when I made the strain, I used pPH1JI as an eviction plasmid to do the double homologous recombination. pPH1JI encodes spec resistance. We have a version of the strain that has lost pPH1JI and is spec-sensitive. Sincerely, Stan 這么說是只有利福平抗性了？ |
3樓2012-03-18 18:06:34
西瓜
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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……這個回復(fù)就糾結(jié)了。 作者說，本來呢，EHA105這東西，應(yīng)該是只有Rif抗性的（染色體編碼）。但是在做這菌株的時候使用了pPH1JI 這個驅(qū)逐質(zhì)粒，pPH1JI 本身編碼Spec抗性基因。所以：如果你的菌株不含pPH1JI 質(zhì)粒，那么它就只有Rif抗性；如果含pPH1JI 質(zhì)粒，那么就同時帶Rif抗性和Spec抗性。 你可以檢測下你的菌株含不含這個質(zhì)粒就知道了。 另外，作者最后說，他們有確定不含pPH1JI質(zhì)粒（不帶Spec抗性）的EHA105，你也可以考慮問他要這個。 |
4樓2012-03-18 18:24:01
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