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mjzjily銅蟲(chóng) (初入文壇)
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關(guān)于基因構(gòu)建中開(kāi)放閱讀框架的若干問(wèn)題
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Sample Text 我剛接觸分子生物學(xué)不久,現(xiàn)在做基因構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。在閱讀文獻(xiàn)時(shí),對(duì)開(kāi)放閱讀框架產(chǎn)生了一些疑問(wèn),請(qǐng)各路高手多多指導(dǎo)了: 1. 我看到一些原核生物基因的ORF,有一部分包含在目的基因的序列中,也有一部分甚至在該基因啟動(dòng)子保守序列的上游。因此,如果要獲得ORF片段的話(huà),我應(yīng)該如何知道哪些片段序列是ORF?只靠預(yù)測(cè)軟件嗎? 2. 在原核生物的基因構(gòu)建時(shí),是不是只要將獲得的目的基因片段連入載體,就可以了?還需要考慮開(kāi)放閱讀框架嗎?若只構(gòu)建目的基因,不考慮ORF,會(huì)不會(huì)影響基因的表達(dá)? 3. 此外,每個(gè)基因都有一個(gè)ORF嗎?可以不含有ORF?Sample TextSample Text |
【分子生物】EPI帖 |

至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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ORF(open reading frame,開(kāi)放閱讀框)是DNA上的一段堿基序列,由于擁有特殊的起始密碼子和直到可以從該段堿基序列產(chǎn)生合適大小蛋白才出現(xiàn)的終止密碼子,該段堿基序列編碼一個(gè)蛋白。ORF的識(shí)別是證明一個(gè)新的DNA序列為特定的蛋白質(zhì)編碼基因的部分或全部的先決條件。 1、片段序列是否ORF,自己用眼睛看太辛苦,用軟件預(yù)測(cè)方便快捷,很多生物軟件都能預(yù)測(cè)的,也有在線(xiàn)預(yù)測(cè)工具。 2、在原核生物的基因構(gòu)建時(shí),要考慮開(kāi)放閱讀框架的,否則影響基因的表達(dá),出現(xiàn)提前蛋白表達(dá)不準(zhǔn)確或不能表達(dá)的情況。 3、每個(gè)結(jié)構(gòu)基因都有相應(yīng)的每個(gè)基因ORF,編碼RNA的基因一般沒(méi)有ORF。 |
銅蟲(chóng) (初入文壇)
![]() 謝謝指導(dǎo)了。還有對(duì)于ORF的長(zhǎng)度,我也有些疑惑。我查了很多有關(guān)原核orf的資料。我的理解是這樣的。您看看是否有錯(cuò)?1.全長(zhǎng)ORF:是指只含有編碼一個(gè)全長(zhǎng)蛋白質(zhì)的序列,也就是指我們平時(shí)從網(wǎng)上查到滴目的基因的序列(從起始密碼到終止密碼)。是這樣嗎? 2.ORF:網(wǎng)上查到說(shuō),基因中的ORF包含并位于開(kāi)始編碼與終止編碼之間。那就是說(shuō),ORF是完全包含在全長(zhǎng)ORF(目的基因序列)中的嗎?還是說(shuō),ORF中有一部分是目的基因序列,另一部分是目的基因上游的序列,包括啟動(dòng)子,甚至啟動(dòng)子更上游的序列? 3.基因構(gòu)建時(shí),要如何考慮ORF的情況,以防止閱讀框架的改變?如果只克隆全長(zhǎng)orf,再連入表達(dá)載體,會(huì)不會(huì)有閱讀框架改變的可能?還是說(shuō)一定要把ORF區(qū)連同目的基因一起構(gòu)建入表達(dá)載體才行? 謝謝啦~~? |

銅蟲(chóng) (初入文壇)

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