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我使用的載體是Pet-32a（+），宿主菌是BL21(DE3)，連接上目的基因后，提取重組質粒進行雙酶切，30微升體系，酶切能看到兩個條帶，但目的基因被切下的條帶很淡很淡，送出去測序，結果正確，但發(fā)送的報告反復說我質粒濃度很低，我進行表達后，確實表達量很不理想，用改目的基因連接到pcDNA3.1(+)上后，轉化JM109，重新提取質粒，酶切使用了30微升體系，只看到載體的條帶，使用了60微升體系后，目的基因的條帶任然非常淡，近乎看不見，送重組菌出去測序，正反兩個方向測序，卻只有正一個方向有結果，表明我目的基因是連接上去了，但另一個方向測序卻無結果，報告說質粒濃度太低，目的基因片段1100，測序公司為北京諾賽。
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