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銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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[求助] 抗體檢測(cè)的問(wèn)題

為什么有的抗體只檢測(cè)內(nèi)源蛋白無(wú)法檢測(cè)外源性蛋白？

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1樓 2012-05-10 12:23:15

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凌波麗

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【答案】應(yīng)助回帖

基于Ediman降解法的蛋白質(zhì)自動(dòng)測(cè)序儀不能直接測(cè)出共價(jià)的氨基酸殘基，用質(zhì)譜儀可以直接測(cè)定出共價(jià)的氨基酸殘基，不過(guò)用質(zhì)譜儀測(cè)序比較貴，你可以用胰蛋白酶或胰凝乳蛋白質(zhì)酶切割內(nèi)源和外源的同種蛋白質(zhì)，用用質(zhì)譜儀測(cè)定出各個(gè)肽段的分子量，加以比較可知道修飾位點(diǎn)大致在那里，然后對(duì)該段肽段測(cè)定修飾位點(diǎn)和類型，可用質(zhì)譜，也可用化學(xué)方法。

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9樓2012-05-23 16:57:01

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★ ★
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-05-18 15:31:16

某種抗體識(shí)別的是抗原上的特定的抗原免疫簇--------包括順序抗原免疫簇和空間抗原免疫簇，沒(méi)有抗原免疫簇就不會(huì)有抗體-抗原的專一性結(jié)合，這與蛋白質(zhì)來(lái)源無(wú)關(guān)。

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2樓2012-05-18 12:14:54

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引用回帖:

2樓: Originally posted by 凌波麗 at 2012-05-18 12:14:54:
某種抗體識(shí)別的是抗原上的特定的抗原免疫簇--------包括順序抗原免疫簇和空間抗原免疫簇，沒(méi)有抗原免疫簇就不會(huì)有抗體-抗原的專一性結(jié)合，這與蛋白質(zhì)來(lái)源無(wú)關(guān)。

但我們買(mǎi)的一個(gè)抗體為什么只能檢測(cè)內(nèi)源的呢？而我們轉(zhuǎn)染進(jìn)去表達(dá)的蛋白卻無(wú)法檢測(cè)，同一種蛋白

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3樓2012-05-20 15:45:59

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★
小丹木木: 金幣+1, 辛苦 2012-05-22 13:49:11

這就是你表達(dá)的蛋白質(zhì)有問(wèn)題，或者被共價(jià)修飾了，包括加了或減了有關(guān)的基團(tuán)，而阻礙抗體靠近，或者引起了不正確的折疊，改變了抗原表位。

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4樓2012-05-20 19:32:38

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