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制作感受態(tài)細胞沒有冰浴有影響嗎?
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| 用DH5α氯化鈣法制備感受態(tài)細胞,沒有在冰浴進行有影響嗎?還有氯化鈣氯化鎂要處理多久?氯化鈣氯化鎂處理有什么作用? |
【分子生物】EPI帖 |
木蟲 (正式寫手)
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正如上面所說的,沒有冰浴的還是扔掉重做吧。 至于冰浴作用是:為了讓細胞膜流動性降低,利于DNA的結(jié)合,同時使細胞暫停生長,維持在對數(shù)生長期的高活性。 氯化鈣冰浴處理半小時即可。作用:在CaCl2溶液中,細胞會發(fā)生膨脹,Ca2+會使細胞膜磷脂雙分子層形成液晶結(jié)構(gòu),促使細胞外膜與內(nèi)膜間隙中的部分核酸酶解離開來,離開所在區(qū)域,誘導細胞成為感受態(tài)細胞。 |
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