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制作感受態(tài)細(xì)胞沒(méi)有冰浴有影響嗎？
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| 用DH5α氯化鈣法制備感受態(tài)細(xì)胞，沒(méi)有在冰浴進(jìn)行有影響嗎？還有氯化鈣氯化鎂要處理多久��？氯化鈣氯化鎂處理有什么作用�。� |
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 【分子生物】EPI帖 |
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【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
黎明715: 金幣+1, ★★★很有幫助 2012-05-21 21:47:38
mengfei8336: MolEPI+1, 謝謝您對(duì)小木蟲(chóng)的關(guān)注~ 2012-05-21 23:56:58
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
黎明715: 金幣+1, ★★★很有幫助 2012-05-21 21:47:38
mengfei8336: MolEPI+1, 謝謝您對(duì)小木蟲(chóng)的關(guān)注~ 2012-05-21 23:56:58
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正如上面所說(shuō)的，沒(méi)有冰浴的還是扔掉重做吧。 至于冰浴作用是：為了讓細(xì)胞膜流動(dòng)性降低，利于DNA的結(jié)合，同時(shí)使細(xì)胞暫停生長(zhǎng)，維持在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的高活性。 氯化鈣冰浴處理半小時(shí)即可。作用：在CaCl2溶液中，細(xì)胞會(huì)發(fā)生膨脹，Ca2+會(huì)使細(xì)胞膜磷脂雙分子層形成液晶結(jié)構(gòu)，促使細(xì)胞外膜與內(nèi)膜間隙中的部分核酸酶解離開(kāi)來(lái)，離開(kāi)所在區(qū)域，誘導(dǎo)細(xì)胞成為感受態(tài)細(xì)胞。 |
4樓2012-05-21 16:14:18
2樓2012-05-21 12:43:48
3樓2012-05-21 13:13:06
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
西瓜: 金幣+2, 辛苦哈 2012-05-22 08:28:38
西瓜: 金幣+2, 辛苦哈 2012-05-22 08:28:38
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- 附件 2 : Inoue法制備大腸桿菌超級(jí)感受態(tài)細(xì)胞.doc
2012-05-21 16:17:36, 400.68 K
2012-05-21 16:18:31, 38.5 K
5樓2012-05-21 16:18:35
6樓2012-05-21 21:48:21
7樓2012-05-22 21:19:59
xuquliang
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很多兄弟做實(shí)驗(yàn)不搞清楚原理，只是照搬操作步驟，如果以后準(zhǔn)備從事科研的話(huà)，基礎(chǔ)的東西還是要打好基礎(chǔ)。 8樓2012-05-23 07:10:18
| 謝謝分享！ |
9樓2014-08-21 02:55:40
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