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yuyitt

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[求助] PAGE跑PCR產(chǎn)物總是有問(wèn)題~~

我PCR出一段具有高度變異性的片段，類(lèi)似于16s rDNA，長(zhǎng)度分別為250bp(+-20bp)及 186bp(+-20bp),PCR產(chǎn)物跑1.5%瓊脂糖沒(méi)有任何問(wèn)題，但是分辨率不高，因此想跑PAGE膠查看下是否正確，但是PAGE膠跑出來(lái)卻是如下，很奇怪很奇怪，這尾巴拉的太長(zhǎng)了吧。PAGE條件是70V，1.5h，8%膠。
下面是2個(gè)PAGE圖：

但是跑瓊脂糖電泳就沒(méi)有問(wèn)題，下面是瓊脂糖膠：

[ Last edited by yuyitt on 2012-5-28 at 20:54 ]

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1樓 2012-05-28 20:53:13

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你用什么染得色？PAGE膠的銀染效果有沒(méi)有試過(guò)？

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3樓2012-05-28 21:16:14

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西瓜: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2012-05-28 21:59:08

你用什么染得色？PAGE膠的銀染效果有沒(méi)有試過(guò)？

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2樓2012-05-28 21:14:11

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西瓜: 回帖置頂 2012-05-28 21:59:20

引用回帖:

2樓: Originally posted by cxb-abc at 2012-05-28 21:14:11
你用什么染得色？PAGE膠的銀染效果有沒(méi)有試過(guò)？

sybr green I染色的。
關(guān)鍵是，marker沒(méi)有任何問(wèn)題，沒(méi)有一點(diǎn)拖尾，但是PCR產(chǎn)物就有拖尾，很奇怪

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4樓2012-05-28 21:23:23

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引用回帖:

3樓: Originally posted by cxb-abc at 2012-05-28 21:16:14
你用什么染得色？PAGE膠的銀染效果有沒(méi)有試過(guò)？

銀染還沒(méi)有試過(guò) ，但是奇怪的是我的結(jié)果marker就沒(méi)有問(wèn)題，而且條帶最下面的分界線(xiàn)很清楚，就是我需要的片段大小。。。。

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5樓2012-05-29 08:49:33

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