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范迪金蟲 (小有名氣)
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[求助]
用HPLC想得到好的精密度,有什么注意事項(xiàng)
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| 我想問下,想保證HPLC有比較好的重現(xiàn)性,精密度,或者RSD值,有哪些注意事項(xiàng)呢?在網(wǎng)上查到的東西好少,求助各位大俠鳥~~~ |
榮譽(yù)版主 (著名寫手)
魂兮

木蟲 (著名寫手)
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首先跟儀器的關(guān)系很大,主流品牌島津、安捷倫、戴安、waters肯定沒問題,其他的要考慮一下儀器本身是否精密度良好。 其次就是操作,重復(fù)性講究進(jìn)樣量一定要準(zhǔn)。想一切辦法保證每次的進(jìn)樣量是準(zhǔn)確的。中間精密度跟稱量、配液、量瓶的校準(zhǔn)都有關(guān)系,盡量一致。 最后就是圖譜的處理,一定要采用同一組積分參數(shù),盡量不要手動(dòng)積分。 我想到的大概就這些。 |

鐵蟲 (初入文壇)
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我以前也做過一些關(guān)于重現(xiàn)性 精密度的試驗(yàn),個(gè)人認(rèn)為: 1.重現(xiàn)性,首先要保證機(jī)器的運(yùn)行穩(wěn)定,色譜柱的柱溫箱是要有的,現(xiàn)在主流的儀器都會(huì)配備,其次,室內(nèi)的溫度對樣品的重現(xiàn)性也有很大的影響,流動(dòng)相通常會(huì)暴露在室內(nèi)環(huán)境,如果變化會(huì)影響出峰時(shí)間。第三,樣品的處理上也要注意,特別是一些易吸附,對光熱敏感的樣品要注意保存,我以前做過一個(gè)樣品,溶解時(shí)間相差1分鐘,含量差了將近20%。第四,對于主成分含量很少的樣品,稀釋過程一定要注意,取樣槍頭的吸附會(huì)產(chǎn)生巨大地影響,稀釋的步驟要盡量少,最好一步到位。第五,進(jìn)針手法,對于進(jìn)樣環(huán)進(jìn)樣,每次的吸取量要達(dá)到進(jìn)樣環(huán)的3倍以上,且每次要求一致。進(jìn)樣過程要緩慢,使進(jìn)樣環(huán)內(nèi)的流動(dòng)相排干凈。少量進(jìn)樣時(shí)要求每次的取樣量一定要穩(wěn)。 2.精密度,這一個(gè)項(xiàng)目主要還是看設(shè)備,專門的色譜柱對應(yīng)專門的產(chǎn)品,色譜柱柱效的好壞對精密度有影響,另外一個(gè)好的流動(dòng)相的配比等一會(huì)產(chǎn)生一些影響。 |
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