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范迪金蟲 (小有名氣)
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[求助]
用HPLC想得到好的精密度，有什么注意事項(xiàng)
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| 我想問(wèn)下，想保證HPLC有比較好的重現(xiàn)性，精密度，或者RSD值，有哪些注意事項(xiàng)呢？在網(wǎng)上查到的東西好少，求助各位大俠鳥~~~ |
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wellyuezi
鐵蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+2, 3Q 2012-06-06 17:57:16
范迪: 金幣+3, ★★★很有幫助 2012-06-07 20:25:40
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+2, 3Q 2012-06-06 17:57:16
范迪: 金幣+3, ★★★很有幫助 2012-06-07 20:25:40
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我以前也做過(guò)一些關(guān)于重現(xiàn)性 精密度的試驗(yàn)，個(gè)人認(rèn)為： 1.重現(xiàn)性，首先要保證機(jī)器的運(yùn)行穩(wěn)定，色譜柱的柱溫箱是要有的，現(xiàn)在主流的儀器都會(huì)配備，其次，室內(nèi)的溫度對(duì)樣品的重現(xiàn)性也有很大的影響，流動(dòng)相通常會(huì)暴露在室內(nèi)環(huán)境，如果變化會(huì)影響出峰時(shí)間。第三，樣品的處理上也要注意，特別是一些易吸附，對(duì)光熱敏感的樣品要注意保存，我以前做過(guò)一個(gè)樣品，溶解時(shí)間相差1分鐘，含量差了將近20%。第四，對(duì)于主成分含量很少的樣品，稀釋過(guò)程一定要注意，取樣槍頭的吸附會(huì)產(chǎn)生巨大地影響，稀釋的步驟要盡量少，最好一步到位。第五，進(jìn)針手法，對(duì)于進(jìn)樣環(huán)進(jìn)樣，每次的吸取量要達(dá)到進(jìn)樣環(huán)的3倍以上，且每次要求一致。進(jìn)樣過(guò)程要緩慢，使進(jìn)樣環(huán)內(nèi)的流動(dòng)相排干凈。少量進(jìn)樣時(shí)要求每次的取樣量一定要穩(wěn)。 2.精密度，這一個(gè)項(xiàng)目主要還是看設(shè)備，專門的色譜柱對(duì)應(yīng)專門的產(chǎn)品，色譜柱柱效的好壞對(duì)精密度有影響，另外一個(gè)好的流動(dòng)相的配比等一會(huì)產(chǎn)生一些影響。 |
4樓2012-06-06 13:42:46
lijin79833
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【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
豆哥: 金幣+1, 謝謝參與交流 2012-06-06 13:20:26
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
豆哥: 金幣+1, 謝謝參與交流 2012-06-06 13:20:26
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首先跟儀器的關(guān)系很大，主流品牌島津、安捷倫、戴安、waters肯定沒(méi)問(wèn)題，其他的要考慮一下儀器本身是否精密度良好。 其次就是操作，重復(fù)性講究進(jìn)樣量一定要準(zhǔn)。想一切辦法保證每次的進(jìn)樣量是準(zhǔn)確的。中間精密度跟稱量、配液、量瓶的校準(zhǔn)都有關(guān)系，盡量一致。 最后就是圖譜的處理，一定要采用同一組積分參數(shù)，盡量不要手動(dòng)積分。 我想到的大概就這些。 |
2樓2012-06-06 12:15:08
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3樓2012-06-06 13:10:06
5樓2012-06-06 17:25:19
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