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bressze木蟲 (小有名氣)
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[求助]
質(zhì)粒中插入21bp片段突變
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我現(xiàn)在需要在原來質(zhì)粒的基礎(chǔ)上插入 21bp的片段,根據(jù)上游和下游的堿基分別有21個(gè)bp互補(bǔ)。所以引物一共是63bp,合成了互補(bǔ)的一對引物,Tm值在72℃,F(xiàn)在是想PCR得到突變質(zhì)粒后DPN1酶切。結(jié)果PCR后取5ul電泳總是沒有條帶,只有引物二聚體出現(xiàn)。我的酶試過 ex taq ,la taq 及普通的taq結(jié)果都一樣。 謝謝大家的幫忙,希望早點(diǎn)解決實(shí)驗(yàn)問題 |

鐵蟲 (正式寫手)

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