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2012-06-06 17:26:40, 1.83 M

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1樓 2012-06-06 17:26:44

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yangbin1

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應(yīng)該是蛋白膠的原因吧。不應(yīng)該是蛋白處理上的問(wèn)題。跑個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品試試，像BSA

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2樓2012-06-06 17:46:21

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mlanqiang

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還應(yīng)該是蛋白質(zhì)的緣故吧。

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藍(lán)精靈

3樓2012-06-06 18:07:25

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vetzcm

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應(yīng)該是細(xì)胞樣品沒(méi)破壞核酸的原因吧試著超聲破碎處理下細(xì)胞再離心，煮樣試試配膠時(shí)凝膠時(shí)間要充分

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4樓2012-06-06 18:31:01

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4樓: Originally posted by vetzcm at 2012-06-06 18:31:01
應(yīng)該是細(xì)胞樣品沒(méi)破壞核酸的原因吧試著超聲破碎處理下細(xì)胞再離心，煮樣試試配膠時(shí)凝膠時(shí)間要充分

我們實(shí)驗(yàn)室就是用超聲破碎后離心的。

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5樓2012-06-06 18:43:36

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引用回帖:

2樓: Originally posted by yangbin1 at 2012-06-06 17:46:21
應(yīng)該是蛋白膠的原因吧。不應(yīng)該是蛋白處理上的問(wèn)題。跑個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品試試，像BSA

我加了Marker，沒(méi)有出現(xiàn)紋理現(xiàn)象，不過(guò)膠越往下面，則marker跑的不平。

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6樓2012-06-06 18:45:29

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跳跳魚(yú)

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這是有拖帶現(xiàn)象吧

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7樓2012-06-06 21:47:16

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zhixuec

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看到你的圖片了

Marker 沒(méi)有問(wèn)題說(shuō)明膠沒(méi)有問(wèn)題

說(shuō)明是你樣品問(wèn)題：包括上樣Loading Buffer，樣品處理等，

從3個(gè)方面入手：
1. 你下次試著將樣品加入Loading Buffer后，煮沸時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)兒
2.還有就是上樣量要控制低一些
3.5%的濃縮膠聚合時(shí)間久一點(diǎn)，至少30min

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酷愛(ài)の族

8樓2012-06-06 22:38:40

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jasonwyb123

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小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)應(yīng)助，歡迎熱心的蟲(chóng)蟲(chóng) 2012-06-07 13:54:38

看樣子不是你膠的問(wèn)題
那就是你樣品處理的事情了
我這邊做，一般啥12000轉(zhuǎn)離心，1min一般就沒(méi)有問(wèn)題
還有煮沸以前我才煮三分鐘，后來(lái)升到5min左右，就是讓蛋白變性而已，沒(méi)必要太久，不過(guò)久一點(diǎn)應(yīng)該也不會(huì)出現(xiàn)你說(shuō)的那種情況
最后一點(diǎn) 我覺(jué)得你該換loading buffer了如果啥自己配制的，重新配制以前我也出現(xiàn)過(guò)一個(gè)問(wèn)題最后就是buffer的原因

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9樓2012-06-07 09:16:22

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sunnyseu

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