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mc2840261新蟲 (初入文壇)
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[求助]
纖維素酶高產(chǎn)菌株篩選時的透明圈問題
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| 小弟在做纖維素酶高產(chǎn)菌株的誘變選育，采用羧甲基纖維素鈉剛果紅培養(yǎng)基，但是透明圈很不明顯，基本上就比菌落大個1mm……想求助下各位大俠，到底是什么原因，有沒有改進的方法，能讓透明圈變的大點~ |
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mc2840261: 回帖置頂 2012-06-12 10:47:33
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這是我當時用的培養(yǎng)基 羧甲基纖維素鈉（CMC）培養(yǎng)基（參考察氏培養(yǎng)基，用羧甲基纖維素鈉取代其中的蔗糖，通過觀察培養(yǎng)基上的菌落生長情況以及水解圈的大小和清晰程度，并經(jīng)反復試驗后，最終確定羧甲基纖維素鈉添加量為0.8%，并在其中添加適量氯霉素以抑制細菌和放線菌的生長，其余配方不變；CMC不易溶于水，在配制該培養(yǎng)基時，加入CMC后，需在80℃的水浴鍋中加熱2h并不斷攪拌使CMC充分溶解。） CMC 0.8% ，NaNO3 0.3%， KCl 0.05%， K2HPO4 0.1%，F(xiàn)eSO4 0.001%， MgSO4•7H2O 0.05%， 瓊脂 2%，氯霉素 0.005%，pH 6.0 ,115℃滅菌15min 剛果紅實驗步驟待所點菌種在CMC平板上長出可見菌落后，往平板里加入適量1mg/ml的剛果紅溶液，染色1h后，棄去染色液，并同時用蒸餾水清洗，最后加入適量1mol/L的NaCl溶液，脫色1小時，觀察水解圈直徑與菌落直徑的大小。 附件中試我當時做的圖片 |
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2012-06-08 09:40:36, 1.08 M
11樓2012-06-08 09:40:39
yhjcwangyw
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