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含羞草liu新蟲(chóng) (小有名氣)
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簡(jiǎn)并引物 PCR擴(kuò)增疑問(wèn)
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我設(shè)計(jì)了一對(duì)簡(jiǎn)并引物，以cDNA第一鏈為模板進(jìn)行擴(kuò)增。當(dāng)退火溫度是45度時(shí)，擴(kuò)增出一條模糊不清的片段，大小將近1000bp，是目的片段，如圖1所示。為了使條帶清晰，改變退火溫度，設(shè)定梯度為40度、45度、50度、55度、60度，均未擴(kuò)增出目的條帶，如圖2所示。出現(xiàn)這種結(jié)果不知什么原因。請(qǐng)大家?guī)蛡�(gè)忙，感激不盡�。�！ 圖1 退火溫度為45度 圖2 梯度退火溫度 |
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4樓2012-06-24 22:22:46
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