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[求助]
實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果分析 已有1人參與
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| 第一次做，用的ddCT法做相對定量。cDNA我稀釋了25倍，每個樣品3個結(jié)果（2復(fù)孔）。結(jié)果是CT值都30以上 RQ min和RQmax之間相差巨大。這是什么原因呢 求解~謝了 |
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【答案】應(yīng)助回帖
| 實(shí)時(shí)檢測PCR擴(kuò)增，在擴(kuò)增的指數(shù)期對起始模板進(jìn)行定量，在擴(kuò)增過程中，熒光信號隨著PCR產(chǎn)物的增加而增強(qiáng)。我們實(shí)驗(yàn)室使用的BIOGHSC Super Probe Kit PCR實(shí)驗(yàn)檢測DNA,測得的循環(huán)數(shù)在28左右，整個PCR過程有4個階段，基線期---指數(shù)增長期---線性增長期---平臺期，指數(shù)增長期內(nèi)，PCR有高度重復(fù)性，一般的檢測指標(biāo)是看線性圖譜的擴(kuò)增曲線的起跳值（CT值）。 |
3樓2019-12-09 13:04:58
Explor
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 1554.8
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- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2019-11-29 15:06:59
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