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wcx蝸牛無蟲 (小有名氣)
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[求助]
T載體連接問題
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| 前期克隆基因往T載體上面連接發(fā)生了突變,現(xiàn)在換高保真酶后還是往T載體上面連接,可是發(fā)生很奇怪的事情。用之前連上T載發(fā)生突變的質(zhì)粒作為對照,現(xiàn)在提出質(zhì)粒比其小,可是雙酶切可以切出我的目的條帶,但酶切后的載體比T載體大(T載體大約2600bp左右,可是現(xiàn)今酶切后顯示載體有3KB多),pcr驗證有很淡的目的條帶。不知是怎么回事,之前連接T載體,出過一樣的情況,后送去測序,結(jié)果全是雙峰。不知是不是有雜菌,還是?求高人指教! |
無蟲 (小有名氣)

金蟲 (正式寫手)
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