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xiao7270

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[交流] 熒光定量PCR里的酶活化的小疑問(wèn)

看到說(shuō)明書(shū)里說(shuō)道：

Instrument                   Step                Temperature (°C)    Duration Cycles
7900HT Fast AmpliTaq® Fast DNA             95                         20 sec    HOLD
                     Polymerase, UP
                           Activation
                           Denature                   95                         1 sec       40
                     Anneal/Extend                   60                            20 sec

不太理解活化那一步里，hold是什么意思。就是95度保持20s，還是95度持續(xù)一段時(shí)間？

[ Last edited by xiao7270 on 2012-6-14 at 10:01 ]

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1樓 2012-06-14 10:00:02

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xiao7270

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3樓: Originally posted by beautybanana at 2012-06-14 11:02:55
這是2步法，第一步95°C，20s，酶的熱啟動(dòng)，時(shí)間是20s。后面是第2步PCR反應(yīng)部分，95°C，1s，60°C，20s，共40個(gè)循環(huán)。

另外，UDG 50度保溫時(shí)間是儀器里默認(rèn)的？還是要手動(dòng)設(shè)置？

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4樓2012-06-14 14:52:45

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beautybanana

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xiao7270: 金幣+2, 謝謝！另外，UDG 50度保溫時(shí)間是儀器里默認(rèn)的？還是要手動(dòng)設(shè)置？ 2012-06-14 11:54:53

這是2步法，第一步95°C，20s，酶的熱啟動(dòng)，時(shí)間是20s。后面是第2步PCR反應(yīng)部分，95°C，1s，60°C，20s，共40個(gè)循環(huán)。

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3樓2012-06-14 11:02:55

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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

引用回帖:

4樓: Originally posted by xiao7270 at 2012-06-14 14:52:45
另外，UDG 50度保溫時(shí)間是儀器里默認(rèn)的？還是要手動(dòng)設(shè)置？...

應(yīng)該是默認(rèn)設(shè)置，如果沒(méi)有就要手動(dòng)補(bǔ)充上去。

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5樓2012-06-14 19:26:13

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5樓: Originally posted by beautybanana at 2012-06-14 19:26:13
應(yīng)該是默認(rèn)設(shè)置，如果沒(méi)有就要手動(dòng)補(bǔ)充上去。...

不太清楚手動(dòng)上去的保溫時(shí)間

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6樓2012-06-18 09:27:38

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