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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 藥學 » 藥物分析 » 摸索色譜條件，從何下手更快呀？
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yilishanshan木蟲 (正式寫手)
大星星
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[求助]
摸索色譜條件，從何下手更快呀？
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最近在摸一個復方制劑含測條件，想多測幾個組分，但其中只有一個組分峰比較高，其他組分好像都降解沒多少了，目前鎖定5個組分，但不知道如何入手，我該怎么辦呀！ 首先，我用最簡單的超聲處理樣品，然后就HPLC進樣，先用甲醇-0.1%磷酸進了一針，效果不好，就改用乙腈-0.1%磷酸，效果相對還行，需要再調(diào)整！ 現(xiàn)在的問題是，我應該盯著乙腈-0.1%磷酸梯度洗脫程序進行修改，直到好為止，不行再考慮其他的。還是拿其他的流動相試試，改變下酸的種類、濃度，或考慮用甲醇-乙腈的混合溶液？ 是把色譜條件優(yōu)化好了，再考慮樣品的處理方法嗎？可是樣品成分復雜，色譜峰有些亂，想純化一下！ 關鍵是，乙腈-0.1%磷酸梯度洗脫程序怎么通過色譜圖來判定做出調(diào)整，我一改變比例，有些峰倒是分開了，但之前分開的峰又不行啦，是否有方法或規(guī)律呢？  |
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yilishanshan
木蟲 (正式寫手)
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9樓2012-06-20 23:12:23
癡夷子皮
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2樓2012-06-15 08:54:19
t892893235
木蟲 (著名寫手)
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【答案】應助回帖
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感謝參與，應助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2012-06-15 23:22:10
感謝參與，應助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2012-06-15 23:22:10
| 色譜摸索的過程遠不如我們想象中的簡單。首先我們得確定樣品是適合正向色譜還是反向色譜（根據(jù)被分析物的極性來看，極性強的物質(zhì)適合用正向來分析；反之用反向色譜法）；其次需要選柱子（對于方向色譜來說，先查下分子量小于2000的話用C18柱，反之用C8柱。還有對被分析物的極性來講，C8柱適合分析弱極性物質(zhì)里極性稍強的一類物質(zhì)，C18反之。）再者就是流動相的優(yōu)化了，一般（反向）用水和乙腈的效果比較好，不過通常還需要再優(yōu)化梯度什么的。樓主可以自己試著摸索一下。 |
3樓2012-06-15 09:00:26
MJF628
金蟲 (職業(yè)作家)
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5樓2012-06-15 20:14:00
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