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[交流]
熒光定量PCR實驗技術
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最近導師叫學一下熒光定量PCR技術，自己看了一些文獻，知道了熒光定量PCR是通過DNA質粒配成不同標準濃度的DNA標準求出標準曲線，由于循環(huán)數與閾值Ct值和起始模板數成反比，而求出DNA的數量。由于本人不是學分子生物學和微生物學的，有幾個問題想像做過熒光定量PCR的大俠交流一下： 1、熒光定量PCR的儀器是否只需要熒光定量PCR儀、電腦和專業(yè)的軟件？ 2、熒光定量PCR的標準DNA濃度要怎么配制？所需的DNA質粒是不是需要買？ 3、熒光定量PCR的成本又多高？我做土壤的總DNA，想問一個樣的成本是多少？ 4、有沒有專業(yè)的系統(tǒng)的介紹熒光定量PCR的書籍或是資料？還請各位大俠教我。 5、看了一些文獻，現在熒光定量PCR大多是用于研究病原菌，想問問目前是否可以用這一技術研究土壤中有益的微生物？ |
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給我掃掃盲好嗎？
7樓2012-06-22 10:20:39
8樓2012-06-22 10:47:32
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
2011210200(金幣+1): 謝謝參與
zhang8826857: 金幣+5, 歡迎來微生物板塊交流^_^ 2012-06-22 13:15:37
小丹木木: 金幣+3, MolEPI+1, 條理很清楚啊，鼓勵正解解答問題 2012-06-22 13:40:10
2011210200(金幣+1): 謝謝參與
zhang8826857: 金幣+5, 歡迎來微生物板塊交流^_^ 2012-06-22 13:15:37
小丹木木: 金幣+3, MolEPI+1, 條理很清楚啊，鼓勵正解解答問題 2012-06-22 13:40:10
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1、熒光定量PCR的儀器是否只需要熒光定量PCR儀、電腦和專業(yè)的軟件？ 熒光pcr當然是需要熒光pcr儀器的，一般價格在40萬左右。半酣電腦，軟件，引物設計軟件。 2、熒光定量PCR的標準DNA濃度要怎么配制？所需的DNA質粒是不是需要買？ 如果你能知道你所提取的基因是說少ng 就不用買了。 3、熒光定量PCR的成本又多高？我做土壤的總DNA，想問一個樣的成本是多少？ 做一次熒光PCR成本大概是普通的3倍吧，順利的話。主要是熒光染料的價格。儀器損耗不做考慮。 4、有沒有專業(yè)的系統(tǒng)的介紹熒光定量PCR的書籍或是資料？還請各位大俠教我。 書肯定是有的。小木蟲就能找到不少，你輸入RTpcr 就有很多 5、看了一些文獻，現在熒光定量PCR大多是用于研究病原菌，想問問目前是否可以用這一技術研究土壤中有益的微生物？ 可以的。熒光PCR和普通PCR差不多，就是能定量檢測擴增效率，底物濃度等。不過不利于PCR產物回收用于接下來的實驗。 |
9樓2012-06-22 12:22:03
10樓2012-06-22 16:56:53
簡單回復
2012-06-22 10:02
回復
2011210200(金幣+1): 謝謝參與
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