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熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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最近導(dǎo)師叫學(xué)一下熒光定量PCR技術(shù)，自己看了一些文獻(xiàn)，知道了熒光定量PCR是通過DNA質(zhì)粒配成不同標(biāo)準(zhǔn)濃度的DNA標(biāo)準(zhǔn)求出標(biāo)準(zhǔn)曲線，由于循環(huán)數(shù)與閾值Ct值和起始模板數(shù)成反比，而求出DNA的數(shù)量。由于本人不是學(xué)分子生物學(xué)和微生物學(xué)的，有幾個(gè)問題想像做過熒光定量PCR的大俠交流一下： 1、熒光定量PCR的儀器是否只需要熒光定量PCR儀、電腦和專業(yè)的軟件？ 2、熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)DNA濃度要怎么配制？所需的DNA質(zhì)粒是不是需要買？ 3、熒光定量PCR的成本又多高？我做土壤的總DNA，想問一個(gè)樣的成本是多少？ 4、有沒有專業(yè)的系統(tǒng)的介紹熒光定量PCR的書籍或是資料？還請(qǐng)各位大俠教我。 5、看了一些文獻(xiàn)，現(xiàn)在熒光定量PCR大多是用于研究病原菌，想問問目前是否可以用這一技術(shù)研究土壤中有益的微生物？ |
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金蟲 (正式寫手)
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2011210200(金幣+1): 謝謝參與
zhang8826857: 金幣+5, 歡迎來微生物板塊交流^_^ 2012-06-22 13:15:37
小丹木木: 金幣+3, MolEPI+1, 條理很清楚啊，鼓勵(lì)正解解答問題 2012-06-22 13:40:10
2011210200(金幣+1): 謝謝參與
zhang8826857: 金幣+5, 歡迎來微生物板塊交流^_^ 2012-06-22 13:15:37
小丹木木: 金幣+3, MolEPI+1, 條理很清楚啊，鼓勵(lì)正解解答問題 2012-06-22 13:40:10
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1、熒光定量PCR的儀器是否只需要熒光定量PCR儀、電腦和專業(yè)的軟件？ 熒光pcr當(dāng)然是需要熒光pcr儀器的，一般價(jià)格在40萬左右。半酣電腦，軟件，引物設(shè)計(jì)軟件。 2、熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)DNA濃度要怎么配制？所需的DNA質(zhì)粒是不是需要買？ 如果你能知道你所提取的基因是說少ng 就不用買了。 3、熒光定量PCR的成本又多高？我做土壤的總DNA，想問一個(gè)樣的成本是多少？ 做一次熒光PCR成本大概是普通的3倍吧，順利的話。主要是熒光染料的價(jià)格。儀器損耗不做考慮。 4、有沒有專業(yè)的系統(tǒng)的介紹熒光定量PCR的書籍或是資料？還請(qǐng)各位大俠教我。 書肯定是有的。小木蟲就能找到不少，你輸入RTpcr 就有很多 5、看了一些文獻(xiàn)，現(xiàn)在熒光定量PCR大多是用于研究病原菌，想問問目前是否可以用這一技術(shù)研究土壤中有益的微生物？ 可以的。熒光PCR和普通PCR差不多，就是能定量檢測(cè)擴(kuò)增效率，底物濃度等。不過不利于PCR產(chǎn)物回收用于接下來的實(shí)驗(yàn)。 |
9樓2012-06-22 12:22:03
給我掃掃盲好嗎？
7樓2012-06-22 10:20:39
8樓2012-06-22 10:47:32
孫啟亮
金蟲 (著名寫手)
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10樓2012-06-22 16:56:53
簡(jiǎn)單回復(fù)
2012-06-22 10:02
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2011210200(金幣+1): 謝謝參與
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