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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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yingyangyang

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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[求助] 切膠回收后片段不單一的原因已有1人參與

我用2%瓊脂糖凝膠跑電泳，切膠回收300-400bp的片段，然后用膠純化試劑盒純化回收的片段，再跑個(gè)電泳，結(jié)果出現(xiàn)了兩條帶，有300-400bp片段和400bp以上一條帶！做了多次都這樣，不知道為什么？？？確定準(zhǔn)確的切300-400的片段，不可能切刀400以上的，但是多次做都是這樣的結(jié)果！為什么呢？？試劑盒也沒(méi)有污染！求解。。。以下是切膠回收后的電泳圖�。∮袃蓷l帶！

[ Last edited by yingyangyang on 2012-6-25 at 12:48 ]

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1樓 2012-06-25 12:47:18

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lyweichen

鐵蟲(chóng) (小有名氣)

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我用過(guò)天根和Qigen的試劑盒，都可以。通常我切膠回收后直接做連接，呵呵，樓主細(xì)心！

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7樓2012-06-27 19:34:12

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dingxiuying

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+3, 很熱心，很中肯的建議 2012-06-25 13:48:01

可能原因：
1、試劑盒有污染。
2、回收試劑有問(wèn)題.
解決辦法：
1、不用試劑盒回收純化，用自己配制的試劑。
2、做二次回收。
3、將膠濃度再加大，跑膠時(shí)間加長(zhǎng)，盡量讓條帶分得開(kāi)一些。
4、換一種marker，盡量使切膠的位置更準(zhǔn)確些。
5、實(shí)在沒(méi)辦法就把所有用到的試劑都重新配制。

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我喜歡默默地被你注視默默地注視著你，我喜歡深深地被你愛(ài)著深深地愛(ài)著你

2樓2012-06-25 13:23:45

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windsor2011

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

是回收條帶的純度不高，可嘗試一下在回收時(shí)將膠切的更碎一些，并加大溶膠液的量，也許效果會(huì)好一些

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只要功夫深鐵杵磨成針

3樓2012-06-26 10:44:49

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yingyangyang

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引用回帖:

2樓: Originally posted by dingxiuying at 2012-06-25 13:23:45
可能原因：
1、試劑盒有污染。
2、回收試劑有問(wèn)題.
解決辦法：
1、不用試劑盒回收純化，用自己配制的試劑。
2、做二次回收。
3、將膠濃度再加大，跑膠時(shí)間加長(zhǎng)，盡量讓條帶分得開(kāi)一些。
4、換一種marker，盡 ...

膠純化的試劑怎么配置呢？有具體的配方嗎？沒(méi)有自己配過(guò)呢！

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4樓2012-06-27 18:22:14

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普通表情龍兔虎貓

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