| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2283 | 回復(fù): 8 | |||
s100700677新蟲 (初入文壇)
|
[交流]
PET-32a雙酶切無法回收 已有8人參與
|
|
用SalI和NotI雙酶切和t載體連接的目的片段及pET-32a空載體,發(fā)現(xiàn)目的片段能一次性順利回收回來并且鑒定完全正確,但空載體酶切后不是沒有條帶(提的質(zhì)粒已經(jīng)鑒定,濃度和質(zhì)量絕對(duì)么有問題),要不有帶但經(jīng)回收后鑒定時(shí)就消失了。。!做了有四次了,只有一次有條帶但鑒定沒有了!剩下的都是回收時(shí)沒有條帶。。。 個(gè)人分析: 1,酶沒有問題,因?yàn)槟康臈l帶順利回收! 2,膠,緩沖液及試劑盒沒有問題,因?yàn)槟康臈l帶順利回收! 3,沒有降解問題,因?yàn)橛袥]有酶切的載體做對(duì)照!且marker跑的很好! 4,提的質(zhì)粒沒有問題吧?!鑒定過了,三條帶非常完整,且亮度足夠! 5,酶切是在37度下進(jìn)行,試過過夜,5小時(shí),4小時(shí),3小時(shí)!體系也試過40ul20ul的等等都優(yōu)化了,結(jié)果都一樣! 這個(gè)實(shí)驗(yàn)以前做過,同樣的實(shí)驗(yàn),只不過最近在重復(fù)做,但就遇到這種情況了,遇到鬼了! 希望各位能幫忙分析一下!不甚感激。。。!謝謝。。。! |
木蟲 (正式寫手)
捐助貴賓 (知名作家)

金蟲 (正式寫手)

金蟲 (正式寫手)
Dreamer

專家顧問 (職業(yè)作家)
T.Shen
![]() |
專家經(jīng)驗(yàn): +57 |

新蟲 (初入文壇)
|
樓主問題解決了嗎?我也遇到了同樣的問題,酶切后跑膠條帶則挺亮的。但是一回收測(cè)濃度就特別低,純度也不好,同時(shí)膠回收別的就可以,只有pET32a不行 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
禁蟲 (小有名氣)
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 320分,材料與化工專業(yè),求調(diào)劑 +7 | 一定上岸aaa 2026-03-27 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 086502化學(xué)工程342求調(diào)劑 +6 | 阿姨復(fù)古不過 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑 +9 | vv迷 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
[考研] 22408 359分調(diào)劑 +3 | Qshers 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +5 | Pigcasso 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
[考研] 298調(diào)劑 +3 | jiyingjie123 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
[考研] 085600材料與化工306 +10 | z1z2z3879 2026-03-21 | 11/550 |
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +8 | hanamiko 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
[考研] 【雙一流院校新能源、環(huán)境材料,材料加工與模擬招收大量調(diào)劑】 +4 | Higraduate 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
[考研] 環(huán)境專碩324分求調(diào)劑推薦 +5 | 軒小寧—— 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
[考研] 07化學(xué)303求調(diào)劑 +5 | 睿08 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +6 | 來好運(yùn)來來來 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
[考研] 26考研-291分-廈門大學(xué)(085601)-柔性電子學(xué)院材料工程專業(yè)求調(diào)劑 +3 | min3 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
[考研] 0854AI CV方向招收調(diào)劑 +4 | 章小魚567 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
[考研] 305分求調(diào)劑(食品工程) +5 | Sxy112 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
[考研] 361求調(diào)劑 +3 | Glack 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
[考研] 269求調(diào)劑 +4 | 我想讀研11 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
[考研] 工科0856求調(diào)劑 +5 | 沐析汀汀 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
[考研] 石河子大學(xué)(211、雙一流)碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
[考研] 求助 +5 | 夢(mèng)里的無言 2026-03-21 | 6/300 |
|