| 查看: 2412 | 回復(fù): 19 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ,點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
[求助]
Western Blot出現(xiàn)問(wèn)題 已有1人參與
|
|||
|
最近Western blot做不出結(jié)果,希望大家多多指教 目的蛋白大小20kD左右,跑SDS可以看到,轉(zhuǎn)膜后也可以看到,但是ECL顯色后沒(méi)有條帶,只有白的亮的一片,而且也不清楚這些亮的一片到底是化學(xué)發(fā)光還是其他什么東西,各位高手有沒(méi)有遇到這種情況,希望能給些好的建議 |
【分子生物】EPI帖 |
銀蟲 (初入文壇)
新蟲 (小有名氣)
|
不知道你所謂的轉(zhuǎn)膜后也可以看到是什么意思?是通過(guò)CBB外其他染色看的嗎? 首先確認(rèn)一下自己的ECL化學(xué)發(fā)光操作步驟是否正確。ECL混合后,膜孵育的時(shí)間是多久?因?yàn)镋CL發(fā)光強(qiáng)度是一個(gè)峰值曲線,過(guò)早或過(guò)完曝光都不合適。曝光時(shí)間可以控制在5-30min之間(排除膜孵育的5min)。 然后請(qǐng)問(wèn)你是否將光圈全開(kāi),曝光時(shí)間是多久? 樓主應(yīng)該是positive成像的吧?即背景是黑色,目的條帶為白色。 如果是這樣的話,全亮的區(qū)域可能有目標(biāo)條帶,可能是由于濃度過(guò)高或者曝光時(shí)間過(guò)久造成的。我就遇到過(guò)濃度過(guò)高的情況,一塊白,而且ECL之后條帶部位都有明顯的棕黃燒焦的顏色。 |

新蟲 (小有名氣)
銀蟲 (初入文壇)
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +9 | 小熊joy 2026-03-14 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[基金申請(qǐng)] 被我言中:新模板不強(qiáng)調(diào)格式了,假專家開(kāi)始管格式了 +4 | beefly 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +5 | 大口吃飯 身體健 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
[考研] 274求調(diào)劑0856材料化工 +13 | z2839474511 2026-03-11 | 14/700 |
|
|
[考研] 0854可跨調(diào)劑,一作一項(xiàng)核心論文五項(xiàng)專利,省、國(guó)級(jí)證書40+數(shù)一英一287 +3 | 小李0854 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +12 | 生如夏花… 2026-03-11 | 14/700 |
|
|
[考研] [導(dǎo)師推薦]西南科技大學(xué)國(guó)防/材料導(dǎo)師推薦 +3 | 尖角小荷 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +3 | 劉夢(mèng)微 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
[考研] 中科大材料與化工319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑(材料與化工327) +4 | 愛(ài)吃香菜啦 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
[考研] 四川大學(xué)085601材料工程專碩 初試294求調(diào)劑 +4 | 祝我們好在冬天 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +7 | 綠豆芹菜湯 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +5 | 超級(jí)伊昂大王 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
[考研] 一志愿211化學(xué)學(xué)碩310分求調(diào)劑 +8 | 努力奮斗112 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
[考研] 材料301分求調(diào)劑 +5 | Liyouyumairs 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 是Lupa啊 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
[論文投稿]
投稿問(wèn)題
5+4
|
星光燦爛xt 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | ADT 2026-03-13 | 3/150 |
|