 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (3540)
- >考研 (721)
- >導(dǎo)師招生 (595)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (224)
- >文獻(xiàn)求助 (89)
- >休閑灌水 (75)
- >碩博家園 (48)
- >招聘信息布告欄 (33)
- >考博 (33)
- >博后之家 (18)
- >綠色求助(高懸賞) (17)
- >論文投稿 (16)
- >基金申請(qǐng) (12)
- >攻關(guān)文獻(xiàn)(高獎(jiǎng)勵(lì)) (8)
- >教師之家 (8)
- >外文書(shū)籍求助 (7)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2432 | 回復(fù): 11 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
使用E.coli復(fù)制質(zhì)粒，提取質(zhì)粒產(chǎn)量很低
|
|||
| 問(wèn)題如題，使用invitrogen的TOP 10 Chemically Competent cell作為宿主菌復(fù)制PCR2.1 載體攜帶基因的質(zhì)粒。culture體積是10ml， 挑單菌落接種，抗性是Gentamicin，我是在菌液OD達(dá)到1.5之后才提取質(zhì)粒的。質(zhì)粒提取用的是qiagen的試劑盒，最后使用50ulEB洗脫，但是質(zhì)粒濃度很低。這是為什么了？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有273人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 一個(gè)質(zhì)�？梢杂卸鄠�(gè)復(fù)制起始原點(diǎn)嗎？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 提純交流50金幣
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 請(qǐng)教關(guān)于利用E.coli S-17 將質(zhì)粒 轉(zhuǎn)移 至 熒光假單胞菌的方法或文獻(xiàn)。
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 大腸桿菌培養(yǎng) 質(zhì)粒提取后困惑
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 對(duì)質(zhì)粒pSE380質(zhì)粒了解的請(qǐng)進(jìn)？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 細(xì)菌質(zhì)粒提取濃度太低求助
已經(jīng)有29人回復(fù)
- pet-32a質(zhì)粒提取量低的原因
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 求 菌種 E.coli JW1870
已經(jīng)有7人回復(fù)
- E.coli DH5a可轉(zhuǎn)化10kb質(zhì)粒嗎
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 轉(zhuǎn)化感受態(tài)后提取質(zhì)粒，測(cè)濃度總是很低
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和質(zhì)粒復(fù)制
已經(jīng)有23人回復(fù)
- E.COLI發(fā)酵罐出現(xiàn)很奇怪的現(xiàn)象！
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 質(zhì)粒快抽有條帶，提取時(shí)卻沒(méi)有了，什么問(wèn)題�。�
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 質(zhì)粒濃度很低 無(wú)法測(cè)序 求挽救措施
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 質(zhì)粒大提，搖菌時(shí)間過(guò)久對(duì)提取的質(zhì)粒有影響嗎？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 十萬(wàn)火急，重組質(zhì)粒酶切只有一條帶，測(cè)序有結(jié)果，但反復(fù)說(shuō)我質(zhì)粒濃度很低
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 提取的質(zhì)粒A260/280是多少說(shuō)明質(zhì)粒的質(zhì)量比較好？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- PCR擴(kuò)增法制備低拷貝質(zhì)粒（替代常規(guī)質(zhì)粒提�。�
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 感受態(tài)細(xì)菌DH5a，BL21中有木有質(zhì)粒？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 質(zhì)粒DNA提取成了這樣，請(qǐng)大家?guī)兔Ψ治鲆幌?/a>
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 【求助/交流】pET29a轉(zhuǎn)化E.coli BL21
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】我用菌液搖菌抽提質(zhì)粒濃度很低，請(qǐng)大家?guī)兔鉀Q下，為什么
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)教一個(gè)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)導(dǎo)的問(wèn)題
已經(jīng)有4人回復(fù)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-07-11 13:40:13
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-07-11 13:40:13
|
你培養(yǎng)體積很大了，但OD不高，培養(yǎng)的時(shí)候蓋子不要扭太緊，以免影響溶氧。另外提質(zhì)粒時(shí)，一般4mL菌液（過(guò)夜培養(yǎng)）足夠。buffer 2孵育一定要2min左右，不要超過(guò)4min。洗脫時(shí)，將Elution buffer加入后，60度溫箱2min，15000離心。 我一般4mL菌液，洗脫體積55uL。濃度基本不低于200 ng/uL，最高時(shí)可以提到600 ng/uL。 |
7樓2012-07-10 16:33:49
dshlove
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- MolEPI: 17
- 應(yīng)助: 237 (大學(xué)生)
- 金幣: 4764.7
- 散金: 20
- 紅花: 10
- 帖子: 852
- 在線: 419.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1609389
- 注冊(cè): 2012-02-10
- 性別: GG
- 專業(yè): 污染控制化學(xué)
2樓2012-07-09 09:00:52
Marado
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
Dreamer
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 81 (初中生)
- 金幣: 1458.8
- 散金: 100
- 紅花: 1
- 帖子: 430
- 在線: 196.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1512351
- 注冊(cè): 2011-11-27
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2012-07-09 09:46:40
snoopyzxx
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
- MolEPI: 4
- 應(yīng)助: 49 (小學(xué)生)
- 金幣: 3232.6
- 散金: 1266
- 紅花: 43
- 帖子: 2256
- 在線: 276.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 548497
- 注冊(cè): 2008-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 全球變化生態(tài)學(xué)
4樓2012-07-09 10:10:17
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 292分，材料與化工，申請(qǐng)調(diào)劑 +19 | 程晴之 2026-04-01 | 21/1050 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0710生物學(xué)求調(diào)劑 +7 | manman511 2026-04-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 273求調(diào)劑 +19 | 李芷新1 2026-03-31 | 19/950 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +11 | yelck 2026-04-01 | 12/600 |
|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +7 | z1z2z3879 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | DADA怪 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | 迷蒙木木 2026-04-01 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程 085701，267求調(diào)劑 +15 | minht 2026-03-29 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 考研材料工程351分調(diào)劑 +5 | 整個(gè)好的 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 318一志愿吉林大學(xué)生物與醫(yī)藥 求調(diào)劑 +6 | 篤行致遠(yuǎn). 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 339求調(diào)劑 +5 | zjjkt 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京科技大學(xué)材料學(xué)碩328分求調(diào)劑 +4 | 1段時(shí)間 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +9 | 小蠟新筆 2026-03-29 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +9 | 楒桉 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東理工大學(xué)，080500學(xué)碩，317分，求調(diào)劑 +9 | s1145 2026-03-31 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)354求調(diào)劑 +15 | 101次希望 2026-03-28 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +3 | Acesczlo 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | @MZB382400 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +3 | raojunqi0129 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-03-27 | 6/300 |
|