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shaozheyun銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
二硫蘇糖醇（簡(jiǎn)稱(chēng)DTT）破壞蛋白質(zhì)二硫鍵
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我要用二硫蘇糖醇（簡(jiǎn)稱(chēng)DTT）破壞蛋白質(zhì)中的二硫鍵，蛋白濃度為0.05%（0.5mg/mL），但我對(duì)二硫蘇糖醇不是很了解，有幾個(gè)問(wèn)題想要請(qǐng)教一下： 1.DTT在使用時(shí)是直接用固體溶解在蛋白溶液還是要先配成高濃度溶液再使用？ 2.對(duì)于1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）溶液的配制 【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，過(guò)濾除菌后分裝成1ml小份貯存于-20℃。 這樣的DTT溶液的配制方法對(duì)嗎？ DTT在PH大于7時(shí)表現(xiàn)還原性，而配置時(shí)是pH5.2是為了防止在貯藏時(shí)被氧化嗎？ 3.DTT的工作濃度大約是多少？就是說(shuō)，在用它去破壞二硫鍵時(shí)要用多大的濃度？？ 敬請(qǐng)期待各位高手為我答疑解惑！不勝感激！！！ |
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2樓2012-07-13 15:10:01
calm277
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3樓2012-07-13 15:25:45
lincyb
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shaozheyun
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