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shaozheyun銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
二硫蘇糖醇（簡稱DTT）破壞蛋白質(zhì)二硫鍵
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我要用二硫蘇糖醇（簡稱DTT）破壞蛋白質(zhì)中的二硫鍵，蛋白濃度為0.05%（0.5mg/mL），但我對二硫蘇糖醇不是很了解，有幾個問題想要請教一下： 1.DTT在使用時是直接用固體溶解在蛋白溶液還是要先配成高濃度溶液再使用？ 2.對于1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）溶液的配制 【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，過濾除菌后分裝成1ml小份貯存于-20℃。 這樣的DTT溶液的配制方法對嗎？ DTT在PH大于7時表現(xiàn)還原性，而配置時是pH5.2是為了防止在貯藏時被氧化嗎？ 3.DTT的工作濃度大約是多少？就是說，在用它去破壞二硫鍵時要用多大的濃度？？ 敬請期待各位高手為我答疑解惑！不勝感激�。�！ |
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lincyb
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6樓2013-01-23 21:19:15
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