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木子hwj銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于液相色譜采用梯度洗脫，物質(zhì)出峰時間的問題
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本人試驗(yàn)采用梯度洗脫，但是出峰時間很奇怪。流動相分別為水與乙腈 梯度條件：0-4min內(nèi)水從95%降到5%；4-8min內(nèi)水相從5%恢復(fù)到95%。 物質(zhì)的出峰時間在4.7min出現(xiàn)。 重現(xiàn)性及峰形都很好。 但這個出峰時間是否很奇怪？請各位高手指教。。。。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xbqewpq: 金幣+3, 經(jīng)典！ 2012-07-24 14:31:25
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xbqewpq: 金幣+3, 經(jīng)典！ 2012-07-24 14:31:25
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我猜測一下，你通過某種手段，得知你的待測峰，應(yīng)該出現(xiàn)在0-4min內(nèi)，但實(shí)際發(fā)現(xiàn)，每次都在4.7min出峰，你想知道是什么原因造成的？ 1. 這是最常見的情況： 你的色譜柱出口端到進(jìn)檢測器的距離是多少？也就是說這部分的PEEK管長度是多少？要知道，樣品在這部分流動也算時間的。文獻(xiàn)中，尤其是儀器廠家的文獻(xiàn)，都不會提及這部分的長度。因?yàn)閮x器廠家在做實(shí)驗(yàn)時，都會把儀器管路連接最優(yōu)化，盡量減小死體積，以防止待測成分保留時間過長。 2. 這種情況就不常見了： 液相的泵出問題了，流動想的比例控制不準(zhǔn)了。 但是我認(rèn)為你的問題還是第一種情況，如果你就是想重復(fù)出文獻(xiàn)的結(jié)論，盡量減少色譜柱出口到檢測器之間的死體積。其實(shí)這個大可不必。 第二種情況嗎？就只能請工程師了。自己不要擅自拆泵。 |
3樓2012-07-24 12:08:25
是不是不用梯度也行��？ 2樓2012-07-24 11:58:06
木子hwj
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5樓2012-07-24 13:31:02
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