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qian86812

新蟲 (初入文壇)

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[求助] 非生物系學(xué)生但是實驗需要想做定量PCR

我現(xiàn)在已經(jīng)有了一特定海域藻類普通PCR測序的結(jié)果，然后我想對其中藻類的三個門（甲藻、硅藻、藍(lán)藻）做定量PCR看下三個門的比例如何，那我現(xiàn)在需要準(zhǔn)備什么呢？引物可以用我原來普通PCR的引物不？質(zhì)粒我又要怎么得到？普通PCR跟定量PCR的步驟區(qū)別就是引物、酶還有條件不一樣嗎？小白一個，請各位大神幫忙�。。�！不用反轉(zhuǎn)錄的，用DNA做的

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1樓 2012-08-09 19:43:44

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

xiadongliang

金蟲 (正式寫手)

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專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

首先，需要保證定量PCR的擴增產(chǎn)物大小在200bp左右。
其次，保證引物對三個門的藻類具有特異性。
再者，就是定量PCR的試劑和儀器了。PCR和定量PCR總的來講才做類似，主要是引物擴增片段有所要求，使用的試劑和儀器不同。還有就是需要后續(xù)的數(shù)據(jù)分析。

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回復(fù)此樓

2樓2012-08-10 10:47:16

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