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davidsailing鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
有關(guān)細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)算的一個(gè)問題 已有1人參與
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剛開始做實(shí)驗(yàn)，要用到細(xì)胞計(jì)數(shù)板，網(wǎng)上和論壇里已經(jīng)有不少關(guān)于細(xì)胞計(jì)數(shù)步驟方法的帖子，對(duì)于這些已經(jīng)不陌生了，在這里想咨詢一下各位老師有關(guān)最后細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)算的一個(gè)問題： 我已經(jīng)了解到的資料： 1、細(xì)胞計(jì)數(shù)板確實(shí)有25x16和16x25的規(guī)格，25x16的計(jì)數(shù)應(yīng)取為四個(gè)角+中央共5個(gè)中格來計(jì)數(shù)，16x25的應(yīng)該取四個(gè)角共4個(gè)中格來計(jì)數(shù)； 2、細(xì)胞計(jì)數(shù)板上計(jì)數(shù)室的體積一般為1mmx1mmx0.1mm=0.1mm?（不考慮2mmx2mmx0.1mm這種我沒有見過的計(jì)數(shù)板規(guī)格） 3、計(jì)數(shù)時(shí)加樣一般取10μl左右，注意操作 4、計(jì)數(shù)時(shí)掌握”計(jì)上不計(jì)下，計(jì)左不計(jì)右“的原則 我查閱到和通過老師師兄們口述的計(jì)算方法（以16x25為例）： 1、以此帖為例http://www.dxy.cn/bbs/topic/6546115 （細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)）/ml＝ （ 四個(gè)格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×10^4 說明：公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。 公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1：1稀釋。 公式中乘以10^4因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為： 1.0mm（長）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）＝0.1mm^3 而 1ml＝1000mm^3 （注：此種方法我們實(shí)驗(yàn)室也在用。） 2、以此帖為例http://wenku.baidu.com/view/93d9708bd0d233d4b14e6954.html （1）16×25 ：將計(jì)數(shù)室放大，可見它含16中格，一般取四角：1、4、13、16四個(gè)中方格（100個(gè)小方格）計(jì)數(shù)（見圖二）。將每一中格放大，可見25個(gè)小格。計(jì)數(shù)重復(fù)3次，取其平均值。 計(jì)數(shù)完畢后，依下列公式計(jì)算： 個(gè)數(shù)/mL=100個(gè)小方格計(jì)數(shù)/ 100 ×400×10000× 稀釋倍數(shù) （2）25×16 中央大方格以雙線等分成25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格，供細(xì)胞計(jì)數(shù)用（見圖三）。一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格（80個(gè)小方格）的細(xì)胞數(shù)。計(jì)數(shù)重復(fù)3次，取其平均值。 計(jì)數(shù)完畢后，依下列公式計(jì)算：個(gè)數(shù)/mL=80個(gè)小方格計(jì)數(shù)/ 80 ×400×10000× 稀釋倍數(shù) 我認(rèn)為第二種計(jì)數(shù)方法是比較正確的，因?yàn)楫吘挂谜麄�(gè)計(jì)數(shù)室（0.1mm?）的細(xì)胞數(shù)來換算。如果按第一種方法是不是可以認(rèn)為取了計(jì)數(shù)區(qū)四個(gè)角的細(xì)胞取平均值得到一個(gè)中格子的細(xì)胞這樣就代表了整個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)的所有細(xì)胞量呢？這樣應(yīng)該是錯(cuò)誤的吧？ 我也看到有些人說，細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)只是一個(gè)估計(jì)，知道數(shù)量級(jí)就可以了，但是第一種方法和第二種方法相比應(yīng)該可以差到一個(gè)數(shù)量級(jí)以上，應(yīng)該不可以當(dāng)做誤差而是錯(cuò)誤了吧？ 因?yàn)闆]有人來指導(dǎo)下究竟該怎么裁決這兩種方法，雖然是個(gè)很小的問題，但是我覺得應(yīng)該明確一下，所以想請(qǐng)問下各位老師有什么看法？如果我在對(duì)計(jì)數(shù)板的使用根本上就有錯(cuò)誤也請(qǐng)老師批評(píng)指正。謝謝大家。 |
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davidsailing
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 17
- 帖子: 14
- 在線: 1.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1379629
- 注冊(cè): 2011-08-25
- 專業(yè): 肝纖維化、肝硬化與門脈高
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今天終于有人給我答疑解惑了~ 主要是忘記實(shí)驗(yàn)診斷的時(shí)候是怎么用細(xì)胞計(jì)數(shù)板的了。其實(shí)第一種應(yīng)該是對(duì)的，因?yàn)檎麄�(gè)網(wǎng)格里共有九個(gè)大格子，第二種方法其實(shí)是取中間一個(gè)密集的有小格子的作為計(jì)數(shù)區(qū)，而第一種是取九個(gè)大格子里面的四個(gè)角做為計(jì)數(shù)區(qū)，這樣的其實(shí)是等價(jià)的，但是在單次計(jì)算的時(shí)候我覺得應(yīng)該是取四個(gè)大格子的平均值更準(zhǔn)確一些，而且這樣數(shù)起來不會(huì)被密集的小格子給遮住視線，所以可能這就是為什么大家都這么數(shù)的原因。 |
9樓2012-11-11 22:33:05
2樓2012-11-09 21:13:22
3樓2012-11-09 21:26:58
4樓2012-11-10 17:58:51
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