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12101008銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
提取植物RNA的實(shí)驗(yàn)過程需要注意哪些細(xì)節(jié)？ 已有3人參與
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| 最近偶爾在題RNA，但用試劑盒提的質(zhì)量總是不好，最近導(dǎo)師給買了RNA提取試劑，目前還沒用不知道效果如何。大家都來討論一下，提取RNA的過程中要注意哪些細(xì)節(jié)，才能讓提取的RNA質(zhì)量更好。 |
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starseacow
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小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流經(jīng)驗(yàn) 2012-11-24 13:45:33
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小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流經(jīng)驗(yàn) 2012-11-24 13:45:33
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1 避免RNA污染 2 有些植物材料含多酚多糖，影響提取，常規(guī)Trizol法提不出來，這就需要考慮使用幼嫩植物組織，添加2-巰基乙醇、二硫蘇糖醇（DTT）或半胱氨酸防止酚氧化（但一般效果并不會(huì)太理想），添加pvp結(jié)合酚；對于多糖，可以通過LiCl沉淀RNA將部分多糖留在上清液中；此外，有些莫名其妙的此生代謝產(chǎn)物也會(huì)影響RNA提取，針對這個(gè)目前沒有辦法。有很多市售的試劑盒號(hào)稱適用于植物RNA提取，但很多時(shí)候也未必好用。如果資金寬裕，可以多買幾種試劑盒試試，否則從基本方法入手，如果遇到問題，再逐漸優(yōu)化方法。 |
2樓2012-11-24 00:42:57
3樓2012-11-24 11:59:08
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4樓2012-11-24 12:56:02
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5樓2012-11-24 19:32:48
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