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12101008銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
提取植物RNA的實驗過程需要注意哪些細節(jié)? 已有3人參與
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| 最近偶爾在題RNA,但用試劑盒提的質(zhì)量總是不好,最近導師給買了RNA提取試劑,目前還沒用不知道效果如何。大家都來討論一下,提取RNA的過程中要注意哪些細節(jié),才能讓提取的RNA質(zhì)量更好。 |
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1 避免RNA污染 2 有些植物材料含多酚多糖,影響提取,常規(guī)Trizol法提不出來,這就需要考慮使用幼嫩植物組織,添加2-巰基乙醇、二硫蘇糖醇(DTT)或半胱氨酸防止酚氧化(但一般效果并不會太理想),添加pvp結(jié)合酚;對于多糖,可以通過LiCl沉淀RNA將部分多糖留在上清液中;此外,有些莫名其妙的此生代謝產(chǎn)物也會影響RNA提取,針對這個目前沒有辦法。有很多市售的試劑盒號稱適用于植物RNA提取,但很多時候也未必好用。如果資金寬裕,可以多買幾種試劑盒試試,否則從基本方法入手,如果遇到問題,再逐漸優(yōu)化方法。 |


銅蟲 (小有名氣)
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