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wangna029.木蟲 (小有名氣)
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[求助]
有關(guān)溶劑出現(xiàn)倒峰問題
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| 用HPLC檢測(cè)藥物的有關(guān)物質(zhì)，使用流動(dòng)相作為溶劑，流動(dòng)相中的水為純凈水，該物質(zhì)的保留時(shí)間大約在12min左右，大概在不到三分鐘出現(xiàn)一個(gè)倒峰，此倒峰被兩個(gè)雜質(zhì)峰包圍，想問下為什么會(huì)出現(xiàn)倒峰，怎么解決，謝謝 |
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wangna029.
木蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 分析儀器與試劑
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謝謝啊，一直忘了回復(fù)。流動(dòng)相倒峰很小，幾乎可以忽略，但供試品的倒峰特別大。后來經(jīng)過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，是因?yàn)楣┰嚻肥且喳}酸鹽的形式存在的，試驗(yàn)了與供試品同物質(zhì)的量濃度的鹽酸進(jìn)樣，發(fā)現(xiàn)鹽酸的倒峰和供試品的倒峰基本是一致的。因?yàn)槲覀兊臋z測(cè)波長(zhǎng)是220nm，在低波長(zhǎng)下檢測(cè)，樣品中的鹽酸會(huì)產(chǎn)生大的倒峰，這個(gè)檢測(cè)方法是藥典中規(guī)定的，所以我們只有扣除掉供試品中的倒峰了。 |
3樓2012-12-18 22:07:06
wjg6670
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
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crity328: 金幣+1, 感謝交流，歡迎常來！ 2012-12-05 18:30:29
wangna029.: 金幣+2, ★★★很有幫助 2012-12-18 22:09:39
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用UV檢測(cè)器出現(xiàn)倒峰正常，說明有一種物質(zhì)在設(shè)定波長(zhǎng)下，吸光度值比流動(dòng)相還低。 解決辦法是：一是想辦法使流動(dòng)相有更小的背景吸收，另外如果流動(dòng)相中添加離子對(duì)試劑或緩沖溶液的話，想辦法選擇在檢測(cè)波長(zhǎng)處具有更小吸收的。例如習(xí)慣用乙酸調(diào)整酸度，在低波長(zhǎng)會(huì)有大的背景吸收，那可以使用無機(jī)酸磷酸來調(diào)整。第二就是想辦法使用長(zhǎng)波長(zhǎng)作為檢測(cè)波長(zhǎng)。第三懷疑試劑不純，那就凈化試劑。 具體問題具體分析。 |
2樓2012-12-05 17:34:35
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