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zishilanxuan金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
目的基因合成在大腸桿菌里能表達(dá)么？
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| 目的基因合成在大腸桿菌里能表達(dá)么？我想問(wèn)一下，P出來(lái)的目的基因和合成的目的基因轉(zhuǎn)到大腸桿菌里，都能正常表達(dá)么？我擔(dān)心合成的表達(dá)不了，還有，合成目的基因都需要設(shè)計(jì)什么么？例如酶切位點(diǎn)，閱讀框之類的東西。在重新設(shè)計(jì)引物能把合成的目的基因在大腸桿菌里能P出來(lái)么？謝謝各位大俠了! |
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zishilanxuan
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3樓2012-12-26 19:12:35
susizheng
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 當(dāng)目的基因由于密碼子的偏好性問(wèn)題，無(wú)法在大腸桿菌里表達(dá)或表達(dá)量很低時(shí)（比如很多真核基因），可以考慮合成基因，合成的時(shí)候，需要對(duì)基因的密碼子按照大腸桿菌的密碼子偏好性進(jìn)行優(yōu)化。至于酶切位點(diǎn)什么的可以先不用考慮，因?yàn)楣緯?huì)將你要合成的基因連接在一個(gè)質(zhì)粒上，你可以重新設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，這時(shí)可以加上你需要的酶切位點(diǎn)。 |
2樓2012-12-26 16:41:31
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