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[求助]
目的片段丟了一截
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| 求指教，最近做TA克隆，目的基因和T載體連好后轉(zhuǎn)化，挑單克隆提質(zhì)粒，可是目的基因丟了好大一段，變小了，有蟲(chóng)友遇到相同問(wèn)題嗎，怎么解決的呢？ |
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zyqdyk
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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4樓2012-12-28 11:17:14
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-12-28 17:25:43
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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-12-28 17:25:43
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這個(gè)問(wèn)題我們實(shí)驗(yàn)室的一位師兄遇到過(guò)，挺麻煩的。 你看一看你的目的基因是不是有部分GC含量很高，這樣的話(huà)PCR可能就跳過(guò)了那一部分，P出來(lái)的基因少一片斷。 遇到這種情況你要換一種更有效的針對(duì)高GC的內(nèi)切酶。 試試看吧，這種問(wèn)題比較常見(jiàn)，多嘗試，也是一個(gè)成長(zhǎng)的過(guò)程。 |
2樓2012-12-27 19:29:22
gyesang
榮譽(yù)版主 (著名寫(xiě)手)
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3樓2012-12-27 20:53:13
5樓2012-12-28 14:49:53
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