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lt7510578銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
原核表達(dá)His-tag怎么去除
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本新手準(zhǔn)備用原核表達(dá)蛋白免疫動(dòng)物，制備多克隆抗體，涉及到融合蛋白His-tag的去除，雖然有人說標(biāo)簽的免疫原性不高，但還是怕影響western blot。求助各位高手有沒有好的方法，給一點(diǎn)意見，跪謝！ |
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2樓2013-01-08 21:18:16
cicelyzh
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| 如果是載體上帶的His-tag通常是可以用酶切去的，如果是克隆基因時(shí)自己加的tag就沒有辦法啦。如果只是做western，不用管his-tag。即使制備的多克隆抗血清能抗His-tag，至少也是抗你的特異蛋白的，而且目的蛋白的抗原性絕對(duì)比his-tag強(qiáng)很多。一般的native蛋白也不會(huì)和his-tag抗體反應(yīng)。 |
3樓2013-01-09 08:29:04
dshlove
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4樓2013-01-09 09:14:39
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