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[求助]
做電泳時蛋白條帶出不來？
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請教一下，為什么做SDS-PAGE時蛋白的條帶出不來，蛋白MARK也出不好?用的是10%的膠，試劑都是新配的. IMG_20130109_雙標.jpg |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wizardfan: 金幣+3, 分析得很詳細 2013-01-11 07:55:39
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如果對于蛋白質(zhì)凝膠電泳沒有什么經(jīng)驗，頭開始做遇上各種情況都是正常的。所以放松點，不要緊張或者很有壓力。在不清楚狀況的時候，重復(fù)實驗是有必要的，說不定重新做膠，確保每一步驟都按照正確程序，該混勻的混勻，上樣要連續(xù)穩(wěn)定不要擠入氣泡導(dǎo)致樣品浮動，電壓穩(wěn)定，染色脫色都要控制。問題就解決了。 就像樓上幾位說的，Marker跑的不好基本說明是膠的問題。但也有可能是上樣時缺乏經(jīng)驗加的不好，我有個同學每次用移液槍做精細的東西手都會不自覺的抖動。 從你的圖片上看，分離膠和濃縮膠中間怎么有條縫。我感覺像樣品在從濃縮膠游到分離教時沿著膠線浮動到了其他地方。因為上面有一條顏色很深的條帶 |
6樓2013-01-11 00:05:54
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8樓2013-01-11 08:42:31
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