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pobiok新蟲 (初入文壇)
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[求助]
做電泳時(shí)蛋白條帶出不來(lái)？
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請(qǐng)教一下，為什么做SDS-PAGE時(shí)蛋白的條帶出不來(lái)，蛋白MARK也出不好?用的是10%的膠，試劑都是新配的. IMG_20130109_雙標(biāo).jpg |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wizardfan: 金幣+3, 分析得很詳細(xì) 2013-01-11 07:55:39
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如果對(duì)于蛋白質(zhì)凝膠電泳沒(méi)有什么經(jīng)驗(yàn)，頭開始做遇上各種情況都是正常的。所以放松點(diǎn)，不要緊張或者很有壓力。在不清楚狀況的時(shí)候，重復(fù)實(shí)驗(yàn)是有必要的，說(shuō)不定重新做膠，確保每一步驟都按照正確程序，該混勻的混勻，上樣要連續(xù)穩(wěn)定不要擠入氣泡導(dǎo)致樣品浮動(dòng)，電壓穩(wěn)定，染色脫色都要控制。問(wèn)題就解決了。 就像樓上幾位說(shuō)的，Marker跑的不好基本說(shuō)明是膠的問(wèn)題。但也有可能是上樣時(shí)缺乏經(jīng)驗(yàn)加的不好，我有個(gè)同學(xué)每次用移液槍做精細(xì)的東西手都會(huì)不自覺(jué)的抖動(dòng)。 從你的圖片上看，分離膠和濃縮膠中間怎么有條縫。我感覺(jué)像樣品在從濃縮膠游到分離教時(shí)沿著膠線浮動(dòng)到了其他地方。因?yàn)樯厦嬗幸粭l顏色很深的條帶 |
6樓2013-01-11 00:05:54
wizardfan
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