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柳杉DNA提取
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蟲友們好!初來咋到,還請多多關(guān)照。 我正用CTAB法提取柳杉的dna,但是最后用70%酒精洗滌倆次后仍然量很多,但是用去跑PCR時,沒結(jié)果。 我的方法是:1,油液氮研磨成粉末,轉(zhuǎn)到加油STE的離心管中,充分搖勻,離心10分鐘,去上清留沉淀。加熱好的CTAB水浴30分鐘,中間搖勻5-8次 2.離心10min,汲取上清液,加等體積的氯仿異戊醇洗滌,(重復(fù)操作直至分層沒有蛋白層) 3,2/3體積的冷異丙醇沉淀30min 4.70%抽提倆次 5.通風(fēng)處催干 6.加30ul的TE溶解 在提取過程中,STE洗滌時糖分很多,不知道是不是糖分沒去干凈,還是怎么的,就是提不出來DNA,還請各位多多指教,萬分感謝!誰有更好的方法,也可以共享一下,謝謝! |
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