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wangcaijuan

鐵蟲(chóng) (初入文壇)

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[求助] 菌落PCR挑菌時(shí)的條件問(wèn)題

我是一個(gè)分子生物新手，做PCR也才3個(gè)月不到。最近需要做克隆了，老師建議用菌落PCR篩選陽(yáng)性克隆菌株。今天上午挑了20多個(gè)菌落來(lái)做PCR。條件什么的我都明白，只是看了實(shí)驗(yàn)室其他人在挑菌時(shí)直接在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上操作，而不是在超凈臺(tái)里。于是我今天也就那樣干了，劃完菌留種后，把tip頭扔到了PCR管子里。可心里始終沒(méi)底兒，所以問(wèn)問(wèn)各位高手，挑菌和劃板時(shí)不在超凈臺(tái)上操作，無(wú)所謂嗎？

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1樓 2013-02-01 13:49:31

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wangcaijuan

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2樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-02-02 12:53:42
挑菌、劃線都應(yīng)該在超凈工作臺(tái)做。
實(shí)際上我是先無(wú)菌槍頭挑單克隆，在另一個(gè)平板上點(diǎn)一下，并做好編號(hào)。然后再用這個(gè)槍頭在PCR管里攪動(dòng)若干下，P出陽(yáng)性克隆后可以直接找對(duì)應(yīng)編號(hào)的克隆，搖菌提質(zhì)粒做進(jìn)一步鑒定。

就是說(shuō)這一系列都在超凈臺(tái)里弄嗎？
包括把槍頭扔到PCR管中也在超凈臺(tái)里？

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5樓2013-02-04 16:21:08

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cicelyzh

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【答案】應(yīng)助回帖

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挑菌、劃線都應(yīng)該在超凈工作臺(tái)做。
實(shí)際上我是先無(wú)菌槍頭挑單克隆，在另一個(gè)平板上點(diǎn)一下，并做好編號(hào)。然后再用這個(gè)槍頭在PCR管里攪動(dòng)若干下，P出陽(yáng)性克隆后可以直接找對(duì)應(yīng)編號(hào)的克隆，搖菌提質(zhì)粒做進(jìn)一步鑒定。

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2樓2013-02-02 12:53:42

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feilongtc07

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【答案】應(yīng)助回帖

★
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wangcaijuan: 金幣+1, ★★★很有幫助 2013-02-05 15:08:23

其實(shí)做多了以后為了方便往往可能不在超凈臺(tái)里的~
嚴(yán)格來(lái)說(shuō)應(yīng)該菌落挑取什么都在超凈臺(tái)內(nèi)~ 問(wèn)題應(yīng)該不大~

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3樓2013-02-04 13:27:31

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wangcaijuan

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引用回帖:

3樓: Originally posted by feilongtc07 at 2013-02-04 13:27:31
其實(shí)做多了以后為了方便往往可能不在超凈臺(tái)里的~
嚴(yán)格來(lái)說(shuō)應(yīng)該菌落挑取什么都在超凈臺(tái)內(nèi)~ 問(wèn)題應(yīng)該不大~

謝謝回復(fù)~~反正已經(jīng)那么做了。

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4樓2013-02-04 16:19:56

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