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[求助]
求助~引物設(shè)計(jì)問(wèn)題
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我的目標(biāo)基因是1011個(gè)堿基，設(shè)計(jì)引物是不是要把前后的堿基全部都拷貝進(jìn)去軟件。然后看在前后基因中能不能找到一對(duì)引物合適。目的基因開(kāi)頭那塊錯(cuò)配率太高了。。 我倒是不用全部都克隆進(jìn)去，取其中一段做抗體的就可以了。 我用prime premier5設(shè)計(jì)，設(shè)計(jì)出來(lái)的都是能克隆目的基因的一段。我想問(wèn)如果我要全部的話，又要前后加上酶切位點(diǎn)保護(hù)堿基，我要怎么設(shè)計(jì)？ 謝謝�。。� |
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【答案】應(yīng)助回帖
amisking: 回帖置頂 2013-02-22 18:52:39
| 一般情況不用管序列內(nèi)部結(jié)構(gòu)的 只要引物不出現(xiàn)這些問(wèn)題就還好 置于酶切位點(diǎn)你可以是你自己課題情況在前后加或者選擇一個(gè)加都可以 沒(méi)什么影響 到時(shí)候看看引物二聚體什么的 你設(shè)計(jì)完軟件會(huì)自動(dòng)評(píng)價(jià)你的引物設(shè)計(jì)情況 如果有很多問(wèn)題（我記得perimer5好像是紅色字體標(biāo)記的就是不理想狀況）的話你前后調(diào)整一下 稍微多加長(zhǎng)或減短一下序列就可以了 如果是特異性的引物 無(wú)法更改位置 那也沒(méi)事 就那樣就好 |
4樓2013-02-22 17:20:33
2樓2013-02-22 14:26:15
3樓2013-02-22 14:29:58
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