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[求助]
大腸桿菌轉(zhuǎn)化的奇怪問題
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| 從E.coli JM109中提取的質(zhì)粒再轉(zhuǎn)化到DH5α中卻怎么都轉(zhuǎn)不進去,質(zhì)粒是pMD19-T,求各位高手幫助。。! |
金蟲 (正式寫手)

木蟲 (初入文壇)
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
新蟲 (正式寫手)
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轉(zhuǎn)不進去是什么意思?涂板過夜后沒有克隆嗎? 覺得可能的原因有: 1. 感受態(tài)是否正常?可以拿control plasmid試一下 2. 抗生素是否用錯? 3. 提取質(zhì)粒的濃度?有時候我們提出來質(zhì)粒,用nanodrop測試三四十或者四五十ng/ul,但是酶切和測序卻發(fā)現(xiàn)什么都沒有。因此,是否已經(jīng)檢測提取出來的質(zhì)粒是否正常? |
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