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為什么我算出來(lái)的酶活那么小呢，都不到1呢 已有2人參與
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在一定條件下，每分鐘釋放出1μmol對(duì)硝基苯酚所消耗的酶量定義為1個(gè)脂肪酶活力單位(U)。 按下式計(jì)算酶活: X=cV/（tm） 式中: X為脂肪酶活力，U•mg-1；c為對(duì)硝基苯酚濃度，μmol•mL-1；V為酸堿調(diào)節(jié)后的反應(yīng)液終體積，mL；m為酶的質(zhì)量，mg；t為作用時(shí)間，min。 我根據(jù)上面公式計(jì)算出來(lái)的脂肪酶活力很小，10的-4次方左右的，有哪位知道是哪里出了問(wèn)題呢？我用的是PNPP法測(cè)酶活性，對(duì)硝基苯酚濃度C根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線算出來(lái)的，底物與酶液反應(yīng)后，用碳酸鈉溶液萃取，最后體積是10ml，反應(yīng)時(shí)間10min，酶的用量是100微升*15mg/ml=1.5mg |
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【答案】應(yīng)助回帖
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我做過(guò)淀粉酶、蛋白酶酶活測(cè)定，都還不錯(cuò)。我用的是試劑盒，最重要的一點(diǎn)就是要確定最適底物濃度，不知道樓主是否做過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定一下。 還有，從你的公式來(lái)看，我怎么覺(jué)得那么別扭呢？請(qǐng)問(wèn)你用的是比色法嗎？或者是滴定法？ 這個(gè)很靈敏的，低也很正常。還有就是樓主是否注意一下單位有無(wú)錯(cuò)誤。 |
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非常龍齊齊
8樓2013-03-20 09:41:30
14樓2013-04-02 10:27:05
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