 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3433 | 回復(fù): 10 | ||
[求助]
求教血漿樣品進(jìn)HPLC前處理過(guò)程
|
||
|
用HPLC測(cè)血漿藥物濃度，預(yù)計(jì)待測(cè)濃度在100ng——4000ng之間。 之前用的血漿處理方法是這樣的： 取100ul血漿樣品，加50ul內(nèi)標(biāo)，850ul甲醇————混勻1min——離心10min————取上清————過(guò)濾進(jìn)樣（每次進(jìn)樣20ul）�！疚矣玫牧鲃�(dòng)相是乙腈和水，標(biāo)準(zhǔn)樣品是用甲醇配制的。】 結(jié)果出來(lái)高中低三個(gè)濃度的回收率呈遞減趨勢(shì)，相差很大，低濃度大概有50%~60%。然后看文獻(xiàn)上的血樣處理方式好像是有這樣的： 取400ul血漿樣品，加20ul內(nèi)標(biāo)，加5ml混合萃取劑————混勻、離心各10min——取上清氮?dú)獯蹈伞?00ul流動(dòng)相復(fù)溶進(jìn)樣。 我的問題是： 1、氮?dú)獯蹈稍購(gòu)?fù)溶的目的是為了濃縮嗎？這一步對(duì)提高回收率有什么作用嗎？用上述文獻(xiàn)中方法處理之后，是不是相當(dāng)于將原來(lái)400ul里的藥物濃縮到最后100ul中（理想中），就是濃度變成了4倍嗎？ 2、我取的血漿樣品只有100ul，而且最后用100ul流動(dòng)相復(fù)溶的話實(shí)在太少了，我用的進(jìn)樣瓶是1ml的，100ul剛蓋過(guò)瓶底，針頭吸不到樣品。我想在原來(lái)用甲醇萃取一遍之后，再加一些甲醇混勻提取一次，這樣會(huì)不會(huì)回收率能高些？ 3、請(qǐng)教各位大神有沒有更好、更簡(jiǎn)單的處理方法？我做的血樣大概有400多個(gè)。。。。。。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
一志愿中國(guó)海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿武理材料305分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
材料專碩英一數(shù)二306
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
085600材料與化工調(diào)劑 324分
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
311求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
26調(diào)劑/材料/英一數(shù)二/總分289/已過(guò)A區(qū)線
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
295求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
354求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
材料專業(yè)求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
求材料調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 小鼠血漿中藥物濃度測(cè)定的問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- LCMS對(duì)血漿樣品分析：低濃度樣品如何解決進(jìn)樣量和樣品濃度的矛盾？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- HPLC測(cè)血藥濃度血樣處理問題
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 蛋白沉淀法處理血漿樣品的穩(wěn)定性
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 血漿樣品沉蛋白后，可以直接去上清液進(jìn)液相分析嗎？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 求助：關(guān)于輔料在HPLC中雜質(zhì)峰很多，干擾多
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助】關(guān)于血漿樣品處理
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助】HPLC測(cè)定血漿中酮洛芬時(shí)，流動(dòng)相的選擇？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助】血漿樣品的前處理
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助】生物樣品的前處理-沉淀蛋白質(zhì)
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助】體內(nèi)分析時(shí)，大鼠血漿里檢測(cè)不出來(lái)藥物怎么辦？急急急
已經(jīng)有40人回復(fù)
餃子8136樓2013-04-01 14:44:58
lmxc_sx
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 21.5
- 帖子: 7
- 在線: 5.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 2309282
- 注冊(cè): 2013-03-01
- 專業(yè): 臨床藥理
2樓2013-04-01 11:21:56
3樓2013-04-01 12:21:01
xxaijwd
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 137 (高中生)
- 金幣: 2433.6
- 散金: 5
- 紅花: 6
- 帖子: 494
- 在線: 55小時(shí)
- 蟲號(hào): 1018947
- 注冊(cè): 2010-05-15
- 性別: MM
- 專業(yè): 藥物分析
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
餃子813: 金幣+20, ★★★★★最佳答案, 非常感謝你的幫助！ 2013-04-08 09:22:37
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
餃子813: 金幣+20, ★★★★★最佳答案, 非常感謝你的幫助！ 2013-04-08 09:22:37
|
氮?dú)獯蹈梢环矫媸菫榱顺ビ袡C(jī)相（萃取時(shí)一般都是二氯甲烷、乙醚等有機(jī)相，一般不會(huì)直接把這些進(jìn)柱子），另外，如果復(fù)溶體積和開始時(shí)血漿體積不同，也能起到濃縮的作用，比如400微升血漿，最后復(fù)溶到100微升，就是濃縮了4倍，更利于樣品的檢測(cè)，但是你用400微升復(fù)溶就沒有濃縮倍數(shù)了。如果講簡(jiǎn)單的樣品前處理的話，對(duì)于常規(guī)方法沒有什么好辦法的，甲醇/乙腈沉淀蛋白樣品處理時(shí)間已經(jīng)很短了，但是樣品相對(duì)液液萃取臟一些，對(duì)柱子不好。 |
4樓2013-04-01 12:29:31
xxaijwd
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 137 (高中生)
- 金幣: 2433.6
- 散金: 5
- 紅花: 6
- 帖子: 494
- 在線: 55小時(shí)
- 蟲號(hào): 1018947
- 注冊(cè): 2010-05-15
- 性別: MM
- 專業(yè): 藥物分析
5樓2013-04-01 12:30:46
7樓2013-04-01 15:03:18
8樓2013-04-01 15:06:10
9樓2013-04-01 15:41:45
星星的眼睛
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- PhEPI: 1
- 應(yīng)助: 1634 (講師)
- 金幣: 7796.8
- 紅花: 41
- 帖子: 2694
- 在線: 824.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 2261661
- 注冊(cè): 2013-01-26
- 專業(yè): 藥劑學(xué)
10樓2013-04-02 10:25:36
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 餃子813 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
50