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sunzhengwang鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
求指點(diǎn) PCR結(jié)果分析
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 cDNA做成之后，加了引物做PCR結(jié)果出來了二條帶，很奇怪； 懷疑是引物問題： 重新?lián)Q新的，結(jié)果還是一樣； 重復(fù)一次，結(jié)果一樣， 難道是cDNA的問題？ 各路神仙幫忙指點(diǎn)一下吧。  |
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2樓2013-04-01 15:09:49
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助，節(jié)日愉快 2013-04-01 15:58:38
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助，節(jié)日愉快 2013-04-01 15:58:38
| 你擴(kuò)增的目的基因是否含有內(nèi)含子？若是有內(nèi)含子，可能是你逆轉(zhuǎn)前RNA中混雜的DNA沒有除盡，所以擴(kuò)增出現(xiàn)的兩條帶一條是由DNA為模板擴(kuò)出，一條是由逆轉(zhuǎn)后的cDNA擴(kuò)出。若沒有內(nèi)含子，可能是你的引物設(shè)計(jì)時(shí)特異性不高與多個(gè)位點(diǎn)結(jié)合，或者是退火溫度有點(diǎn)低出現(xiàn)了非特異性擴(kuò)增。 |
3樓2013-04-01 15:37:15
sunzhengwang
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4樓2013-04-02 10:11:48
qqxs
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6樓2013-04-02 12:49:20
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7樓2013-04-02 15:11:44
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8樓2013-04-02 16:33:20
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9樓2013-04-02 16:34:42
zhenwuhuang
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10樓2013-04-02 16:45:26
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