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[交流] 做PCR時混合液用管

為了保證PCR每管成分、含量相同，做PCR時，一般會將各成分預先混勻，再分裝到各管。以前一直用的是OXYGEN的1.5ml 管，后來覺得太浪費了，就買了一包國產(chǎn)1.5ml 管，沒想到，最近一個基因都擴不出來，郁悶了。為什么PCR管可以買國產(chǎn)的，1.5ml 管就不行，PCR體系應該都比較穩(wěn)定了，可為什么一個都擴不出來呢？

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1樓 2013-04-25 10:32:44

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覺得是試劑是不是出問題了管子出問題的情況較少

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8樓2013-04-26 22:44:21

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cicelyzh

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PCR沒做出來可能有其它原因吧，我覺得不應該是做master mix管子的事情。

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2樓2013-04-25 12:35:00

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用過國產(chǎn)的，挺穩(wěn)定的，估計不是這個原因。
可以再配制一批混合液，分別用國產(chǎn)和OXYGEN的分裝，再同時PCR試一試，估計，兩個就都能出來了。

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3樓2013-04-25 12:38:23

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2樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-25 12:35:00
PCR沒做出來可能有其它原因吧，我覺得不應該是做master mix管子的事情。

嗯還在找原因

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4樓2013-04-25 16:35:52

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3樓: Originally posted by chunhua0312 at 2013-04-25 12:38:23
用過國產(chǎn)的，挺穩(wěn)定的，估計不是這個原因。
可以再配制一批混合液，分別用國產(chǎn)和OXYGEN的分裝，再同時PCR試一試，估計，兩個就都能出來了。

嗯謝謝再做做看

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5樓2013-04-25 16:36:09

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絕對不是國產(chǎn)管的問題，我們菌落PCR的時候配MIX就是國產(chǎn)管，沒出現(xiàn)過問題！

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6樓2013-04-25 16:39:06

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6樓: Originally posted by Renavatio at 2013-04-25 16:39:06
絕對不是國產(chǎn)管的問題，我們菌落PCR的時候配MIX就是國產(chǎn)管，沒出現(xiàn)過問題！

再找找原因難道是takara酶的問題怎么能突然就擴不出來了呢

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7樓2013-04-25 16:47:14

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主要看dNTP，酶，引物，模板。管子可能性不大。

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9樓2013-04-28 09:23:59

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sherry_wang: 金幣+1, 現(xiàn)在基本可以排除管子的問題了再找找其他原因 2013-04-28 09:53:31
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應該不是管子的問題吧，你可以做一個對比，看看結(jié)果。
我經(jīng)常配體系的時候就用國產(chǎn)1.5ml的管子

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10樓2013-04-28 09:33:13

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8樓: Originally posted by 北極星※ at 2013-04-26 22:44:21
覺得是試劑是不是出問題了管子出問題的情況較少

緩兩天再做說不定一下子就出來了呵呵

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11樓2013-04-28 09:52:36

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dafeizizhu

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我可以肯定地告訴你，管子不是問題。影響PCR的因素很多，至少有十來個，哪個有問題就會沒有PCR結(jié)果。

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12樓2013-04-28 10:32:52

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12樓: Originally posted by dafeizizhu at 2013-04-28 10:32:52
我可以肯定地告訴你，管子不是問題。影響PCR的因素很多，至少有十來個，哪個有問題就會沒有PCR結(jié)果。

說的對啊以前一直擴的好好的換了管子和酶就不行所以第一反應就是管子的問題再找找原因呵呵謝謝

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13樓2013-04-28 21:49:51

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alicelchf

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axygen吧？呵呵

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14樓2014-01-03 17:12:51

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14樓: Originally posted by alicelchf at 2014-01-03 17:12:51
axygen吧？呵呵

老帖了呵呵我寫錯了

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15樓2014-01-06 10:42:01

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