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PCR-DGGE實(shí)驗(yàn)中PCR總出現(xiàn)非特異條帶，求幫助！
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各位大神，用細(xì)菌通用引物PRBA338F（341F） and PRUN518R（534R）擴(kuò)V3可變區(qū)，總沒法獲得單一條帶（以前從未遇到），求大神幫忙分析下，謝謝了！ PCR體系50ul：10*EX buffer 5uL; dNTP 4uL；20uM引物各1uL；EX Taq（TaKaRa） 0.6uL（5U/uL）；模板1uL。 PCR反應(yīng)：94度5min；94度1min，55度1min，72度1min，共30個(gè)循環(huán)；72度延伸10min。 電泳染料是Gel-red，用的0.5*TBE緩沖液，電壓110V。 PCR圖.jpg DNA2副本.jpg |
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