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[求助]
堿性蛋白Native-PAGE
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| 現(xiàn)在老板讓做蛋白的Native-PAGE,但是我們實驗室之前沒有人做這個,查資料又有好多地方不明白,不知道哪位大俠有這方面的經驗,傳授一下 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
新蟲 (小有名氣)
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你做的酸性非變性膠是一種方法。就是注意要把電極反向連接。因為蛋白是帶正電荷的,所以會向負極跑。 配方如下: 1. 分離膠:0.06M KOH,0.376M Ac,pH4.3(7.7%,丙烯酰胺:甲叉丙烯酰胺=37.5:1 ) 2. stacking膠:0.06M KOH,0.063M Ac,pH6.8(3.125%,丙烯酰胺:甲叉丙烯酰胺=3:1) 3. 電泳緩沖液:0.14M 2-丙氨酸,0.35M Ac,pH4.5 如果你要做的蛋白形成多聚體或者是分子量比較大,可以試試BN-PAGE。 |
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